qPCR:大麻的微生物测试的有力工具

某些微生物方法的适用性大麻测试已经成为一个相当大的科学辩论的大麻。

这个问题被登上报纸头条最近为州议员在马萨诸塞州受到抨击拒绝标准化微生物测试方法。决定批准后两个大麻的批评尽管测试实验室休闲大麻测试许可测试设备使用dna定量聚合酶链反应(qPCR)技术,另使用传统的培养方法(中医)。

对比观点也导致规则的改变周围的使用在其他州的技术;加州的大麻控制局最近提出了一个新的测试套件规定支持毒株特异性pcr方法的使用,不包括要求更一般的酵母和霉菌总数(TYMC),使用中药的质量控制测试。此举违背了的建议加州大麻行业协会质量控制委员会,支持这两种技术,但觉得排除TYMC要求是不必要的公共安全风险。

了解更多关于qPCR测试技术,我们采访了伊冯Helbert,资深科学家的研究和发展药物基因组学。药物基因组学是一个大麻遗传学专家研究和创造了第一个cannabis-specific验证微生物安全检测平台,称为PathoSEEK,使用qPCR方法。

亚历克斯小吏(AB):是什么让qPCR这样一个强大的大麻矩阵分析技术?

伊冯Helbert (YH):大麻矩阵非常复杂。除了许多微生物生活在植物表面,也有内生菌,细菌或真菌生活在植物不会引起明显的植物疾病。由于大多数文化技术依赖于可行的检测细胞生长媒介,他们不溶解植物细胞打开看到内生病原体基于dna的方法一样。

曲霉属真菌是一个已知的植物体内寄生菌,四个曲霉菌属(flavus,来自烟、尼日尔和terreus)是已知的人类病原体。因此必须花样品细胞溶解,这样内生菌是准确地捕获。

阿瑟:如何广泛使用的或公认的qPCR技术?

你怎么qPCR技术广泛应用于基因表达、基因分型、病原体检测、病毒量化,产前基因检测,血液检查,肿瘤检测和更多。qPCR市场被认为是准确的“黄金标准”,敏感和快速量化的核酸序列。全球qPCR和数字PCR (dPCR)市场预计将达到63亿美元,到2025年,根据一项报告由大观点研究公司。

阿瑟:在你看来,什么是使用培养的电镀技术的主要缺陷是一种微生物分析?

你怎么培养的电镀技术未能区分致病性,有益的,和良性微生物,使他们可怜的安全指标。如前所述,文化电镀技术无法检测植物内生菌可导致假阴性结果。阿瑟:在传统的电镀方法qPCR有什么优势?怎么一点qPCR比镀快——结果可以获得在小时,而不是几天。比镀qPCR也更准确。qPCR检测化验积极寻找特定DNA序列由一个家庭共享的微生物。如果DNA存在,qPCR会探测到它。这种活跃的方法意味着我们只能设计特有的化验,目标病原物种,如曲霉菌和STEC大肠杆菌。

文化电镀更被动。你本质上是将细胞生长介质,希望它足够良好的成长所以你可以数一数。问题是只有一小部分微生物文化。如果你有多个微生物在同一介质,他们会互相竞争。我们已经表明,培养后的微生物种群的组成可以比实际截然不同的植物。

阿瑟:还有什么你想强调的药物基因组学的工作是做什么?

你怎么药物基因组学已经发展和验证SenSATIVAx DNA提取设备和PathoSEEK qPCR检测化验专门为大麻微生物测试。

这很重要,因为许多其他微生物测试解决方案大麻已经从食品行业,据我们所知还没有验证大麻。大麻是一个非常复杂的矩阵,有三种主要形式:干燥花,大麻提取物,集中和食物。

花是lipid-rich,使很粘。这提出了一个挑战,因为lipid-rich矩阵不能抽样与简单的水出现。脂质需要溶解在水中完全样本矩阵需要一个强大的裂解缓冲。虽然快速而简单的水预备呼吁快速耗费劳动提取他们未能完全样品花的微生物多样性。花也充满毛状体,萜烯,大麻类增加一层难以评估微生物多样性。提取和集中的范围可以从酒精油药酒,整个植物提取物。食物可以是任何东西。

我们的DNA提取包在设计时考虑到所有的这些矩阵。

德国技术的另一个特色是,DNA提取工具提取微生物DNA和大麻的DNA。然后使用大麻DNA作为一个内部积极控制在所有的PathoSEEK检测化验。这个内部积极控制信号显示了DNA提取过程,qPCR试验设置,检测运行都是成功的。