DNA聚合酶技术的十年创新

Thermo Scientific Phusion高保真DNA聚合酶目前正在庆祝其10周年。我利用这个机会赶上了赛默飞世尔科技公司，以了解更多关于这些高保真DNA聚合酶的知识。

AB:对于那些可能没有听说过Phusion这个名字的读者，你能告诉我更多关于这个系列的信息吗?

Fisher热:十年前，芬兰的一个研究小组成功地开发出一种非常强大的DNA聚合酶，其错误率比传统的低50倍Taq聚合酶。该酶基于独特的融合蛋白技术，旨在提高PCR效率，并解决PCR的一些局限性。融合蛋白技术由融合在一起的两个组成部分组成，一个加工因子(一个嗜热的，非特异性的，双链DNA结合蛋白)和一个校对DNA聚合酶。除了预期的可靠读取长度的增加外，这种PCR酶还表现出许多其他可取的特征，包括保真度的提高(超过52倍)TaqDNA聚合酶)，对各种PCR抑制剂的抗性和更快的整体性能。该酶已使许多PCR应用精简，并仍然引领今天的高保真PCR市场。

在过去的十年里，Phusion产品家族已经发展到包括独立酶，主混合物和热启动酶，所有都带有可见的绿色缓冲液，可以直接将反应产物加载到凝胶上。这些融合酶使直接PCR协议的创建成为可能，用户根本不纯化DNA;这意味着样品(植物、动物组织或血液)可以直接放入PCR混合物中进行扩增。

阿瑟:Phusion为研究人员提供了哪些主要功能?

Fisher热:

•极高的保真度-比常用保真度高52倍TaqDNA聚合酶。这使得研究人员生成的PCR产物的序列错误几率非常低。
•长扩增子-更高的加工酶，可生成高达20kb的产品。
•快速扩增-允许用户大幅减少PCR循环时间
•抗抑制剂-允许用户甚至放大纯度次优的模板

阿瑟:Phusion促成了什么著名的研究吗?

Fisher热:Phusion旨在简化扩增过程，减少序列错误的数量，并有效地使用具有挑战性的模板。Phusion通常用于协议的优化和改进阶段，而不是在新方法开发的开始阶段。然而，有大量的小组已经使用Phusion来完成他们的初始项目，因为他们无法达到标准聚合酶的必要技术灵敏度水平。事实上，我们很高兴地看到，我们的高保真Phusion酶使Inostics的一个团队能够开发一种名为“beam”的技术。这项技术的独特之处在于它可以灵敏地检测ctDNA中的罕见突变，并促进癌症研究和诊断。

阿瑟:你们最近推出了Phusion Green高保真DNA聚合酶，扩大了产品范围，这款产品如何补充现有的产品范围?

Fisher热:我们的客户越来越希望在工作流程的每一步都能节省时间、材料和成本。为了帮助研究人员实现这些节约，我们为Phusion产品提供了包含电泳跟踪染料和密度试剂的缓冲溶液。这使我们的客户从他们的工作流程中省去了许多步骤，例如在运行凝胶之前需要购买染料和在移液步骤中使用染料。简单地说，聚合酶链反应产物可以在循环后直接加载到凝胶上。我们的客户很喜欢。

阿瑟:最后你能不能多告诉我一点什么鬼Phusion真的成立吗?

Fisher热:Phusion DNA聚合酶，与所有其他校对酶一样，对dUTP不耐受，dUTP是一种存在于DNA中的非自然核苷酸，经过某些过程，如亚硫酸氢盐转化。因此，我们的一些客户将受益于Phusion U，一个即将推出的新的Phusion突变版本。Phusion U将能够在DNA模板中容忍dUTP，以及能够将dUTP用于使用UDG的遗留污染等技术。

即使没有额外的增强，新客户继续在他们的新应用中使用Phusion高保真DNA聚合酶。我们相信，我们的Phusion技术在未来许多年都将受到需求。

更多关于Phusion高保真DNA聚合酶和Phusion Fest的信息可以通过访问找到www.thermoscientific.com/phusion

赛默飞世尔接受了技术网络执行主编阿什利·博德的采访。188金宝搏备用你可以找到阿什利谷歌+并关注科技网络188金宝搏备用推特．