生物仿制飙升开车需要抗体鉴定
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精确的蛋白质鉴定尤为重要,在生物制药行业,在产品的修改会影响疗效和安全性。
在这个两部分的系列中,我们跟马修到来,咨询科学家水域。这里,马太福音描述的重要性和挑战biotherapeutic蛋白质特性,分析和讨论了不同的技术用于变体。
在第二部分马修将说明如何利用生物制药行业受益于色谱技术的进步。
缩写:CE:蒸发器电泳;cIEF:毛细管等电点聚焦;IEX:离子交换色谱法;LC:液相色谱;马伯:单克隆抗体;质量控制:质量控制
米歇尔·威尔逊(MW):为什么可再生的和准确的分析方法对蛋白质表征如此重要?
马修到来(ML):许多biotherapeutics尚未普遍可用的许多人口由于高昂的成本,但他们仍然是非常有效的药物产品。与此同时,我们看到了激增的发展生物仿制药品(通用形式的生物药物)由于biotherapeutic期满专利。
说明这些所谓的生物仿制药生物等效性的不是那么简单和药品由相对较大、复杂的蛋白质,可以挑战”来形容。除此之外,生物制药市场蓬勃发展,从创新企业寻求新的模式和mAb-based疗法。
因此,发展生物仿制开发和持续的研究,开发,和商业化的新biotherapeutic单克隆抗体(mAb)实体驱动的需求准确的,可再生的蛋白质分析方法鉴定。
兆瓦:是什么让马伯的制造和表征挑战呢?
ML:很多因素使单克隆抗体的生产和表征(mab)极具挑战性。首先,mab高度复杂的生物大分子,这几十年来长期流行的治疗提供了许多威胁生命和慢性疾病,如癌症。它们包含众多领域,定义特异性的马伯取决于抗原的结合区域,位于抗原结合片段。马伯也可能大小和电荷变体,易受酶后转译修饰,如糖基化和二硫键的形成,最终每个马伯带来一种非常独特的概要文件。除此之外,mab也容易受到化学修改,如氧化脱氨基,在净化和存储基于暴露和老化。
兆瓦:你能解释一下biotherapeutic蛋白质特征的监管环境吗?
ML:监管环境的间接影响的技术用于biotherapeutic蛋白质鉴定。监管机构如美国食品和药物管理局和协调国际会议(我)和生物制药行业新药应用程序,有时提供指导表征技术包括理化特性、生物学特性、免疫化学表征,杂质和污染物的分析。推荐给每一个方法可以不同,但有一个要求分子研究的很透彻。
兆瓦:分析技术是首选马伯一级结构的特征?
ML:电荷变异分析是一个监管要求biotherapeutic蛋白质,正如我所言,谁(世界卫生组织)的指导方针,也给推荐的生物制剂的评价标准。1 - 3指南推荐马伯的理化特性的主要结构和使用液相色谱(LC),包括凝胶排阻层析法、反相色谱法,离子交换色谱法(IEX),和亲和色谱法。替代技术,如毛细管电泳(CE)和毛细管等电聚焦(cIEF),也提出了。
兆瓦:你能解释电荷变体biotherapeutic蛋白质特性分析和它的作用?
ML:由于他们经常定义为关键质量属性在生物制药的发展过程中,电荷变异需要仔细的描述来保证安全性和有效性。4电荷变体可以呈现酸性(等电点较低的物种)或基本变体(更高的等电点的物种),根据特定生产条件或马伯的固有属性。
可以产生额外的收取异质性马伯过程开发和制定。因此,电荷变异分析是采用生物制药管道,从探索阶段到制造和质量控制(QC)阶段。描述电荷变化在生物仿制开发过程的早期可以减轻药物的风险失败在管道,因为它有助于识别任何区别生物仿制和创新药物和它提供的信息与化学稳定性及其物理化学问题的后果。
兆瓦:什么是最受欢迎的技术,负责变体分析?
兆瓦:是什么让马伯的制造和表征挑战呢?
ML:很多因素使单克隆抗体的生产和表征(mab)极具挑战性。首先,mab高度复杂的生物大分子,这几十年来长期流行的治疗提供了许多威胁生命和慢性疾病,如癌症。它们包含众多领域,定义特异性的马伯取决于抗原的结合区域,位于抗原结合片段。马伯也可能大小和电荷变体,易受酶后转译修饰,如糖基化和二硫键的形成,最终每个马伯带来一种非常独特的概要文件。除此之外,mab也容易受到化学修改,如氧化脱氨基,在净化和存储基于暴露和老化。
兆瓦:你能解释一下biotherapeutic蛋白质特征的监管环境吗?
ML:监管环境的间接影响的技术用于biotherapeutic蛋白质鉴定。监管机构如美国食品和药物管理局和协调国际会议(我)和生物制药行业新药应用程序,有时提供指导表征技术包括理化特性、生物学特性、免疫化学表征,杂质和污染物的分析。推荐给每一个方法可以不同,但有一个要求分子研究的很透彻。
兆瓦:分析技术是首选马伯一级结构的特征?
ML:电荷变异分析是一个监管要求biotherapeutic蛋白质,正如我所言,谁(世界卫生组织)的指导方针,也给推荐的生物制剂的评价标准。1 - 3指南推荐马伯的理化特性的主要结构和使用液相色谱(LC),包括凝胶排阻层析法、反相色谱法,离子交换色谱法(IEX),和亲和色谱法。替代技术,如毛细管电泳(CE)和毛细管等电聚焦(cIEF),也提出了。
兆瓦:你能解释电荷变体biotherapeutic蛋白质特性分析和它的作用?
ML:由于他们经常定义为关键质量属性在生物制药的发展过程中,电荷变异需要仔细的描述来保证安全性和有效性。4电荷变体可以呈现酸性(等电点较低的物种)或基本变体(更高的等电点的物种),根据特定生产条件或马伯的固有属性。
可以产生额外的收取异质性马伯过程开发和制定。因此,电荷变异分析是采用生物制药管道,从探索阶段到制造和质量控制(QC)阶段。描述电荷变化在生物仿制开发过程的早期可以减轻药物的风险失败在管道,因为它有助于识别任何区别生物仿制和创新药物和它提供的信息与化学稳定性及其物理化学问题的后果。
兆瓦:什么是最受欢迎的技术,负责变体分析?
ML:LC提供一个健壮的、生物制药分析和高分辨率的方法,因此,深受许多实验室。其高度的选择性协助马伯的分析变异可能几乎相同的物理化学性质。在潜在的LC技术,是IEX广泛采用的分离和表征马伯变异物种。我们已经看到IEX技术的进步。它是一种常用的基于离子通道分离分子的LC组暴露在一种蛋白质的表面。
阴离子交换剂结合带负电荷的实体,而阳离子交换器绑定带正电的实体。后者已被证明是非常有用的对于马伯给定,大多数马伯倾向于承担积极的净电荷在很大范围内的pH值条件(如pH值6到8)。在实践中,与离子交换分离LC列也相对容易生产。样品可以吸附固定相在低离子强度条件下,筛选了梯度增加盐或流动相pH值的变化。
兆瓦:在其他技术IEX色谱的优点?
ML:CE和cIEF速度分析的基本利益,他们通常只需要最小的方法开发。然而,IEX色谱法的一个关键优势CE / cIEF,这对其他物种是能够收集分离分析,包括结构表征和测试确认生物学意义。例如,IEX分数可以收集并用于配体绑定/表面等离子体共振研究来确定绑定的治疗目标是保存。
相比之下,它仍然是不切实际的收集满意的CE或者cIEF分离的物种。此外,最近的报告表明,IEX色谱法可以很容易地耦合到质谱仪在线质谱(MS)检测,5或用于多维分离深马伯的表征。6这不是那么容易促进与CE或cIEF女士使用不兼容的两性电解质。许多分析师因此认为IEX作为电荷变异分析的“黄金标准”。
兆瓦:
哪种类型的梯度产生最好的结果,为什么?
ML:如前所述,IEX色谱洗脱可以通过使用盐,或pH-based梯度。两种流动相组成的变化可以用来破坏蛋白质之间的静电相互作用和固定相。拥有一个可再生的、灵活、准确IEX方法变异生物制药行业的分析是必要的。尽管salt-based梯度一直是显而易见的方法,推动加快转变的结果导致平台pH梯度方法的考虑,不需要独特的裁剪方法条件为每个单独的靶蛋白。在过去的十年里,pH-based梯度大幅增加的流行,主要是为其全球适用于许多不同的马伯。7
尽管马伯的两种梯度模式产生洗脱顺序变异通常可比,pH梯度提供更快的获得高分辨率剖面。pH-based梯度的再现性和易于实现也让他们呼吁方法转移到QA / QC和合同研究组织。
马修到来米歇尔·威尔逊说,科学技术网络作家188金宝搏备用
引用:
ML:如前所述,IEX色谱洗脱可以通过使用盐,或pH-based梯度。两种流动相组成的变化可以用来破坏蛋白质之间的静电相互作用和固定相。拥有一个可再生的、灵活、准确IEX方法变异生物制药行业的分析是必要的。尽管salt-based梯度一直是显而易见的方法,推动加快转变的结果导致平台pH梯度方法的考虑,不需要独特的裁剪方法条件为每个单独的靶蛋白。在过去的十年里,pH-based梯度大幅增加的流行,主要是为其全球适用于许多不同的马伯。7
尽管马伯的两种梯度模式产生洗脱顺序变异通常可比,pH梯度提供更快的获得高分辨率剖面。pH-based梯度的再现性和易于实现也让他们呼吁方法转移到QA / QC和合同研究组织。
马修到来米歇尔·威尔逊说,科学技术网络作家188金宝搏备用
引用:
- 国际协调会议(我)Q6B,规格:测试程序和验收标准,生物技术/生物产品,1999年3月。
- 评估指南类似biotherapeutic产品(sbp),生物制品标准化专家委员会,2009年10月世界卫生组织(世卫组织)。
- 评估指南单克隆抗体类似biotherapeutic产品(sbp),生物制品标准化专家委员会,2017年世界卫生组织(世卫组织)。
- 辛格SK, Narula G和拉索尔教授(2016)应收取变体单克隆抗体疗法被认为是关键质量属性?电泳,37岁,2338 - 2346页。DOI 10.1002 / elps.201600078。
- 勒布朗,y;雷蒙,c;Bihoreau:;Chevreux G。,负责单克隆抗体的变异特征离子交换色谱法耦合本机质谱在线:案例研究长期储存后+ 5度c .色谱法杂志》上。B,分析技术在生物医学和生命科学2017,1048,130 - 139。
- Gstottner c;克莱姆d;Haberger m;Bathke, a;Wegele h;钟,c;科夫,R。、快速、自动化的抗体变异特征4 d高效液相色谱/女士。分析化学2018、90 (3),2119 - 2125。
- 德K, K和做饭Cubbon年代(2017)电荷变异分析的色谱法的发展生物制药,列,13(9),28-32页。
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