PeriTune——一个克隆优化平台
眼镜蛇生物制剂之间的合作项目和曼彻斯特大学的最近获得£217 k资金,作为英国的一部分,计划开发工业生物技术。
更多地了解项目和希望达到的目的,我们采访了托尼•希区柯克眼镜蛇生物制剂的技术总监。
问:眼镜蛇生物制剂,在曼彻斯特大学,已获得£217 k的资助英国工业生物技术创新竞争催化剂。你能告诉我们更多关于这个项目吗?
TH:主动£20米内基金来支持工业生物技术的发展支持英国和生物技术和生物科学研究委员会(BBSRC),技术战略委员会(英国现在创新)和工程和物理科学研究委员会(EPSRC)。有五种类型的奖项可用-早期阶段:翻译;早期阶段:可行性研究;工业研究;后期阶段:pre-experimental可行性研究;和后期阶段:实验的发展。曼彻斯特大学的这个项目授予(UoM)和眼镜蛇生物制剂(眼镜蛇)之间的关系最初的可行性计划。
问:PeriTune项目已获得的资金。这个项目的目标是什么?
TH:项目的总体目标是开发一种低成本的高通量筛选的分子结构和发酵条件的生产新型重组蛋白在细菌细胞周质系统。同时有现有的高通量筛方法可用来确定表达式的候选人,他们是基于复杂昂贵的机器人系统,需要多次的筛选。这个项目的目的是将这两个功能给一个强大的低成本与增加成功率比屏幕的方法通常是用这些方法来实现。
从工作计划的角度来看,这将包括基于高通量分子生物学筛选系统的发展来确定最佳领袖氨基酸序列模型治疗细胞周质蛋白产品。并行眼镜蛇将在房子离UoM RiboTite技术转让和开发治疗细菌宿主菌株蛋白质产品引进RiboTite表达系统生产菌株。高吞吐量的输出屏幕将评估新生成的生产菌株的眼镜蛇。
问:该项目将利用RiboTite技术,曼彻斯特大学的发展。你能解释一下这项技术是如何工作的,它将项目中扮演的角色?
TH: RiboTite表达系统是由一系列工程大肠杆菌菌株和的表达质粒。独特的特性是,它使用信使rna设备,或正交riboswitches操作层面的翻译起始(2010年迪克森等PNAS)。这个特性允许严格控制基底表达式没有感应,可协调的控制表达式在一个广泛的动态范围。
在当前PeriTune项目我们将应用的可协调的功能RiboTite主人的分泌能力相匹配。在应用技术分泌优化作为项目的一部分,我们将进一步微调部分表达系统。
问:为什么它有利于控制目标蛋白的表达只出现在周质,而不是在细胞质中?
TH:传统方法在细菌蛋白质生产系统经常导致包涵体的形成(与感兴趣的蛋白质总量高)在宿主细胞的细胞质中。同时可以进一步处理这些包涵体(并在很多情况下)这需要额外的处理步骤(增加时间和成本)。此外,很多小说和新类型的蛋白质疗法,我们被要求制造要求内部二硫键的形成传授在分子结构稳定性和正确的函数。这些类型的债券并不会形成有效的(或在某些情况下)细胞质内的E。杆菌,但在周质细菌。因此,我们希望开发一个系统,允许表达目标蛋白质的精细控制耦合到周质目标,为了克服的表达式并允许正确的二硫化物键的形成。一个额外的好处是,周质不太丰富的蛋白质含量在蛋白质污染细胞质中也可以帮助净化步骤制造。
问:如何协作眼镜蛇生物制剂中获益呢?
TH:眼镜蛇的大部分业务是基于制造业的发展和提供解决方案给我们的客户经常寻求带来新的和创新的蛋白质产品的诊所和越来越多需要基于微生物的生产路线。这种方法和技术将提供显著改善眼镜蛇的技术我们可以提供客户,进而希望翻译增加了商业上的成功。自成立以来在20年前,眼镜蛇一直试图发展长期合作关系与领先的学术团体在英国提高能力和参与了许多过去成功的合作,我们希望这个项目将会导致一个长期关系UoM进一步加强和发展这个令人兴奋的技术。
托尼·希区柯克说安娜玛丽麦克唐纳,编辑技术网络。188金宝搏备用
更多地了解项目和希望达到的目的,我们采访了托尼•希区柯克眼镜蛇生物制剂的技术总监。
问:眼镜蛇生物制剂,在曼彻斯特大学,已获得£217 k的资助英国工业生物技术创新竞争催化剂。你能告诉我们更多关于这个项目吗?
TH:主动£20米内基金来支持工业生物技术的发展支持英国和生物技术和生物科学研究委员会(BBSRC),技术战略委员会(英国现在创新)和工程和物理科学研究委员会(EPSRC)。有五种类型的奖项可用-早期阶段:翻译;早期阶段:可行性研究;工业研究;后期阶段:pre-experimental可行性研究;和后期阶段:实验的发展。曼彻斯特大学的这个项目授予(UoM)和眼镜蛇生物制剂(眼镜蛇)之间的关系最初的可行性计划。
问:PeriTune项目已获得的资金。这个项目的目标是什么?
TH:项目的总体目标是开发一种低成本的高通量筛选的分子结构和发酵条件的生产新型重组蛋白在细菌细胞周质系统。同时有现有的高通量筛方法可用来确定表达式的候选人,他们是基于复杂昂贵的机器人系统,需要多次的筛选。这个项目的目的是将这两个功能给一个强大的低成本与增加成功率比屏幕的方法通常是用这些方法来实现。
从工作计划的角度来看,这将包括基于高通量分子生物学筛选系统的发展来确定最佳领袖氨基酸序列模型治疗细胞周质蛋白产品。并行眼镜蛇将在房子离UoM RiboTite技术转让和开发治疗细菌宿主菌株蛋白质产品引进RiboTite表达系统生产菌株。高吞吐量的输出屏幕将评估新生成的生产菌株的眼镜蛇。
问:该项目将利用RiboTite技术,曼彻斯特大学的发展。你能解释一下这项技术是如何工作的,它将项目中扮演的角色?
TH: RiboTite表达系统是由一系列工程大肠杆菌菌株和的表达质粒。独特的特性是,它使用信使rna设备,或正交riboswitches操作层面的翻译起始(2010年迪克森等PNAS)。这个特性允许严格控制基底表达式没有感应,可协调的控制表达式在一个广泛的动态范围。
在当前PeriTune项目我们将应用的可协调的功能RiboTite主人的分泌能力相匹配。在应用技术分泌优化作为项目的一部分,我们将进一步微调部分表达系统。
问:为什么它有利于控制目标蛋白的表达只出现在周质,而不是在细胞质中?
TH:传统方法在细菌蛋白质生产系统经常导致包涵体的形成(与感兴趣的蛋白质总量高)在宿主细胞的细胞质中。同时可以进一步处理这些包涵体(并在很多情况下)这需要额外的处理步骤(增加时间和成本)。此外,很多小说和新类型的蛋白质疗法,我们被要求制造要求内部二硫键的形成传授在分子结构稳定性和正确的函数。这些类型的债券并不会形成有效的(或在某些情况下)细胞质内的E。杆菌,但在周质细菌。因此,我们希望开发一个系统,允许表达目标蛋白质的精细控制耦合到周质目标,为了克服的表达式并允许正确的二硫化物键的形成。一个额外的好处是,周质不太丰富的蛋白质含量在蛋白质污染细胞质中也可以帮助净化步骤制造。
问:如何协作眼镜蛇生物制剂中获益呢?
TH:眼镜蛇的大部分业务是基于制造业的发展和提供解决方案给我们的客户经常寻求带来新的和创新的蛋白质产品的诊所和越来越多需要基于微生物的生产路线。这种方法和技术将提供显著改善眼镜蛇的技术我们可以提供客户,进而希望翻译增加了商业上的成功。自成立以来在20年前,眼镜蛇一直试图发展长期合作关系与领先的学术团体在英国提高能力和参与了许多过去成功的合作,我们希望这个项目将会导致一个长期关系UoM进一步加强和发展这个令人兴奋的技术。
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