免疫印迹实验失败的成本
克莱尔Standen
抗体价格,质量程度的验证和支持供应商之间的数据差异很大。大公司往往对自己产品的广度,但可靠性、抗体的特异性和灵敏度这些来源可能无法满足你的期望。相反,你可以选择一个公司,生产和抗体内部验证自己的抗体,与你共享数据的方法。描述的不当可能缺乏特异性的抗体,导致假阳性结果,或者不够敏感,导致假阴性结果。更糟糕的是,没有适当的控制,抗体可能没有明显的失败,你可能会继续该项目基于错误的结果。
样品制备和运行之间的污点,可以耗时和昂贵的西部片。样品准备可以增加的成本,特别是如果组织样本或主要使用细胞培养。例如,实验室动物样本嵌入成本、住房等。它可以以周为动物达到成熟除了实际时间的实验。这意味着样本集合可以最终花费数千美元,需要几周,甚至几个月,你的时间。这将是一个悲剧,毕竟这项工作,一个验证抗体不当导致实验失败。
免疫印迹失败迫使你回去执行广泛的故障排除。这意味着你需要花时间和金钱优化实验条件,例如通过滴定抗体,所以你有更少的时间花在其他的实验。与此同时,你宝贵的资金正在消失。由于这些原因,重要的是使用一种抗体,你可以相信第一次和每次工作。为了确保这一点,你的抗体充分验证和有一个已知的最佳稀释。减少失败的风险,你可以验证你的抗体通过确保它符合以下要求:
•一个干净的乐队在使用控制细胞/组织预期的分子量
•特异性确认下列一个或多个:
这包括运行多个西方印迹和可能需要购买额外的试剂,可以是昂贵的。或者,你可以购买抗体的供应商已经履行了上述标准和高质量的股票数据。这些证明抗体免疫印迹最大化你的机会成功。最终,这将帮助你获得可靠的数据发布和推进你的项目更快,以较低的成本。
•所述的协议
•故障排除技巧
•伴侣产品推荐
考虑实验室费用不如愉快的调查你最喜欢的信号通路。然而,由于研究资金困难,它应该考虑当选择你的试剂为西方墨点法。是有意义的记住你的主要抗体的质量,因为整个实验的成功取决于抗体是可靠的,具体的和敏感的。如果抗体不执行如预期实验可能会失败。和免疫印迹失败的成本可能比你想象的更多。
抗体价格,质量程度的验证和支持供应商之间的数据差异很大。大公司往往对自己产品的广度,但可靠性、抗体的特异性和灵敏度这些来源可能无法满足你的期望。相反,你可以选择一个公司,生产和抗体内部验证自己的抗体,与你共享数据的方法。描述的不当可能缺乏特异性的抗体,导致假阳性结果,或者不够敏感,导致假阴性结果。更糟糕的是,没有适当的控制,抗体可能没有明显的失败,你可能会继续该项目基于错误的结果。
样品制备和运行之间的污点,可以耗时和昂贵的西部片。样品准备可以增加的成本,特别是如果组织样本或主要使用细胞培养。例如,实验室动物样本嵌入成本、住房等。它可以以周为动物达到成熟除了实际时间的实验。这意味着样本集合可以最终花费数千美元,需要几周,甚至几个月,你的时间。这将是一个悲剧,毕竟这项工作,一个验证抗体不当导致实验失败。
免疫印迹失败迫使你回去执行广泛的故障排除。这意味着你需要花时间和金钱优化实验条件,例如通过滴定抗体,所以你有更少的时间花在其他的实验。与此同时,你宝贵的资金正在消失。由于这些原因,重要的是使用一种抗体,你可以相信第一次和每次工作。为了确保这一点,你的抗体充分验证和有一个已知的最佳稀释。减少失败的风险,你可以验证你的抗体通过确保它符合以下要求:
•一个干净的乐队在使用控制细胞/组织预期的分子量
•特异性确认下列一个或多个:
o激活剂或抑制剂治疗o积极和消极细胞系或组织o磷酸酶phospho-specific抗体治疗o击倒使用核或其他方式,或敲除使用小鼠模型
•最佳稀释由滴定
这包括运行多个西方印迹和可能需要购买额外的试剂,可以是昂贵的。或者,你可以购买抗体的供应商已经履行了上述标准和高质量的股票数据。这些证明抗体免疫印迹最大化你的机会成功。最终,这将帮助你获得可靠的数据发布和推进你的项目更快,以较低的成本。
•所述的协议
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克莱尔Standen博士是春秋国旅的科学作家和编辑。
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