比较CD45 +损耗的方法浓缩的传播肿瘤细胞在骨髓样本

背景
传播肿瘤细胞(DTC)在骨髓(BM)样品,只有一个频率的DTC每1 x10⁶细胞,相当罕见。1-2x10转轨国家通常是利用免疫荧光染色检测⁶单核细胞(跨国公司)和连续的微观分析。增加转轨国家的检出率更高数量的细胞应该分析。从微观检测这些细胞很费力DTC浓缩策略是必要的。在这里,我们调查了三个不同的效率损耗CD45的策略⁺细胞在BM DTC浓缩样品。

方法
CD45⁺癌症患者的细胞耗竭进行BM样本不同的实体肿瘤。Immunomagnetic CD45的损耗(动力学)⁺细胞后进行聚蔗糖密度梯度离心法x107 1日跨国公司利用CD45 Dynabeads^®(表达载体)和我)4 x10⁷珠子/毫升细胞悬液(DYNLO)和ii) 1 x10⁸珠子/毫升细胞悬液(DYNHI)。基于抗体的CD45的损耗(ROS)⁺/ CD66b⁺细胞进行1 x10⁸BM RosetteSep细胞^®人类CD45损耗鸡尾酒(干细胞的技术)。为不同的策略至少60个样本分析,损耗效率计算和DTC数据外推到比较各自的方法。

结果
我们能够探测到转轨国家在32.7% (DYNLO), 12.5% (DYNHI)和66% (ROS)病人的样本,分别。CD45⁺细胞可以耗尽最有效地使用ROS高达440倍,其次是使用DYNLO 44-fold DYNHI和20倍。DTC的人数明显高于(p< 0.0001)的ROS样本(平均= 3.69)21转轨国家每1 x10⁶细胞。immunomagnetic程序DYNLO样本(意味着= 0.48)DTC计数较高(8.33 vs 6.35每1 x10转轨⁶细胞)相比DYNHI(平均= 0.39)。

结论
在我们的手ROS过程显示最好的结果从BM DTC浓缩样品。这种方法使分析大量的细胞,因为它消耗不必要的CD45⁺细胞最高效,从而提高DTC患者样本中的检出率。