自我炎症抑制蛋白ISG15的抑制通过阻断滋养层迁移和侵袭引发子痫前期
目的:干扰素诱导的泛素样修饰物15蛋白(ISG-15)对蛋白质的共价结合(又名ISGylation)负向调控IFN-α/β反应。在人类中，ISG15基因的纯合子功能丧失突变抑制淋巴细胞中干扰素(IFN)-γ的产生，并诱导异常的高IFN-α/β介导的免疫反应，引起严重的自体炎症。血浆和蜕膜白介素(IL)-6表达升高和蜕膜IFN信号通路受损与子痫前期(PE)相关。利用微阵列分析，我们发现IL-6在原代细胞滋养层(CTB)培养物中抑制ISG15的表达。我们的原位分析显示，PE与对照胎盘的间质CTBs表现出明显较低的ISG15免疫反应性。本研究探讨了ISG15在CTB迁移和侵袭中的作用。
材料与方法:采用免疫组化法检测长蜕膜标本中细胞特异性ISG15的表达(n=4)。在正常和ISG15-siRNA沉默的HTR8/SVneo细胞(人类妊娠早期绒毛膜绒毛外植体来源的永久化细胞滋养层细胞)上进行迁移和侵袭试验，使用非包被和基质包被的转运孔，并在12孔培养板上进行24小时伤口愈合试验。统计分析采用学生t检验。
结果:在基底蜕膜细胞中，免疫染色显示在间质CTBs中ISG15的原位表达最高。HTR8培养物的免疫印迹和qRT-PCR证实，与对照组siRNA相比，ISG15 siRNA处理显著降低了ISG15蛋白和mRNA水平。相对比显微镜观察到ISG15 siRNA处理后HTR8培养细胞变平变大。此外，ISG15 siRNA沉默减少了HRT8的迁移(Mean±SEM 0.410±0.05 vs. 0.679±0.080;P = 0.026;N =6)，侵袭(0.373±0.02 vs. 0.573±0.06;p = 0.024;n=5)，与对照组siRNA处理4 ~ 12 h相比，延迟体外伤口愈合。
结论:这些结果表明，ISG15表达水平对滋养层形态和功能(迁移/侵袭)至关重要。通过阻断滋养层入侵，ISG15水平的降低可能导致PE中螺旋动脉转化受损，从而减少子宫-胎盘血流量。因此，诱导ISG15表达可能对子痫前期有治疗作用。
NICHD支持U01HD087213。
材料与方法:采用免疫组化法检测长蜕膜标本中细胞特异性ISG15的表达(n=4)。在正常和ISG15-siRNA沉默的HTR8/SVneo细胞(人类妊娠早期绒毛膜绒毛外植体来源的永久化细胞滋养层细胞)上进行迁移和侵袭试验，使用非包被和基质包被的转运孔，并在12孔培养板上进行24小时伤口愈合试验。统计分析采用学生t检验。
结果:在基底蜕膜细胞中，免疫染色显示在间质CTBs中ISG15的原位表达最高。HTR8培养物的免疫印迹和qRT-PCR证实，与对照组siRNA相比，ISG15 siRNA处理显著降低了ISG15蛋白和mRNA水平。相对比显微镜观察到ISG15 siRNA处理后HTR8培养细胞变平变大。此外，ISG15 siRNA沉默减少了HRT8的迁移(Mean±SEM 0.410±0.05 vs. 0.679±0.080;P = 0.026;N =6)，侵袭(0.373±0.02 vs. 0.573±0.06;p = 0.024;n=5)，与对照组siRNA处理4 ~ 12 h相比，延迟体外伤口愈合。
结论:这些结果表明，ISG15表达水平对滋养层形态和功能(迁移/侵袭)至关重要。通过阻断滋养层入侵，ISG15水平的降低可能导致PE中螺旋动脉转化受损，从而减少子宫-胎盘血流量。因此，诱导ISG15表达可能对子痫前期有治疗作用。
NICHD支持U01HD087213。
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