使用慢向量标记类器官
AMSBIO已经为德国法兰克福Buchmann分子生命科学研究所(BMLS)的Francesco Pampaloni和他的团队提供了定制的慢载体,使他们能够可视化类器官中的细胞核和f -肌动蛋白细胞骨架。
类器官是形态异质的三维细胞培养系统,为理解哺乳动物器官在发育、稳态、再生和发病过程中集体细胞行为的原则提供了理想的模型。为了研究类器官的潜在细胞组织原理,BMLS研究人员使用显微技术对数百个胰腺和胆管癌类器官进行了平行成像。
由于这项开创性工作,BMLS研究人员能够在单细胞(微观尺度)、个体类器官(中尺度)和整个培养(宏观尺度)水平上监测类器官的发育和量化行为。这些详细的个体类器官量化已经帮助BMLS为研究中的胰腺和胆管癌类器官生成了一个基于机械3D制剂的模型。
BMLS研究小组的博士生Michael Koch说:“由于上皮类器官具有干细胞样的特征,这使得它们难以转导,因此需要优化转导协议。AMSBIO定制的高滴度慢病毒颗粒为我们提供了一个理想的解决方案。通过用H2B-eGFP和LifeAct-mCherry标记(上皮)类器官,使用AMSBIO慢载体/慢病毒颗粒,我们能够在稳定的荧光信号下,在几天内(通过光片显微镜/LSFM)研究类器官发育的动态细胞过程。这些定制的慢载体使我们能够深入了解上皮类器官发育的高度动态过程,如形成、极化和腔内扩张。在整个研究过程中,AMSBIO通过讨论载体设计的可能选项,为我们的类器官的最佳传递和表达提供了极大的支持。我们强烈推荐AMSBIO定制慢病毒用于长期活显微镜研究中荧光标记要求高/脆弱的细胞,并会毫不犹豫地再次使用他们的服务”。
AMSBIO的业务部门经理Maja Petkovic博士评论说:“我们很高兴被BMLS的研究人员选中,提供慢病毒表达荧光融合蛋白H2B-eGFP来可视化细胞核,LifeAct-mCherry来可视化f -肌动蛋白细胞骨架,从而使他们能够跟踪其类器官发育的细胞动态。”她补充说:“我们的慢病毒载体是有价值的基因传递工具。我们可以提供定制服务,为任何特定基因制作现成的组成型或诱导型过表达慢病毒。我们会将您选择的基因亚克隆到我们的慢病毒表达载体中,并为每个基因生成表达慢病毒”。
AMSBIO的慢病毒系统是一种新型的基因传递工具,使用慢载体进行基因表达或敲除。慢病毒可以有效转导分裂性和非分裂性哺乳动物细胞,并整合到宿主基因组中,使基因在体内外均能长期稳定、高水平表达。与传统的逆转录病毒系统不同,AMSBIO慢病毒更积极地导入非分裂细胞的细胞核,并稳定地整合到宿主细胞的基因组中,不依赖于细胞周期。