食品中病毒检测的创新方法
由于肠道病毒暴发的数量不断增加,拥有可靠和广泛适用的技术来检测和定量食品样品中的病毒就变得更加重要。此外,由于肠道病毒的感染剂量很低,因此在对食品进行病毒病原体的筛查时,需要采用敏感的方法。到目前为止,目前检测肠道病毒的“金标准”是定量逆转录PCR (RT-qPCR),但这种方法不能区分感染病毒和灭活病毒。传染性病毒数量与RT-qPCR检测到的基因组副本数量之间的关系不是恒定的,主要是在食物样本中,因为这一比例可能会因环境条件而变化。一种有前途的评估病毒传染性的新策略依赖于使用核酸插层染料或活性染料,如单叠氮乙啶(EMA)或单叠氮丙啶(PMA)作为应用分子技术之前的样品预处理。理论上,这些化合物不能穿透完整的衣壳,但能够穿透损坏或破坏的衣壳。一旦渗透,染料在强可见光照射下以共价插入RNA,干扰PCR扩增。到目前为止,活性染料结合RT-qPCR已成功应用于病毒悬液,以区分感染病毒和灭活病毒。然而,活性染料在食品样品中区分感染病毒和灭活病毒的有效性很少被研究。
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