利用DLS/Raman研究溶菌酶的热展开过程
动态光散射(DLS)和拉曼光谱的结合能够从水蛋白质悬浮液中提取丰富的化学、结构和物理参数。通过将这两种技术合并到一台仪器中,可以在单个小体积样品上的单个实验中同时确定蛋白质的二级和三级结构以及大小变化。由于它能够同时监测蛋白质的结构变化和大小变化,这种交叉技术在研究蛋白质的展开时特别有用,因为在展开过程中,蛋白质的二级和三级结构随着大小的变化而变化。
在这里,我们证明了使用联合DLS/拉曼仪器研究溶菌酶展开过程作为热应力的可行性。在pH值为4的溶菌酶溶液上进行热跳跃和斜坡实验。拉曼和DLS结果表明,由于温度升高(高达80°C)而发生的任何蛋白质结构和大小变化都是可逆的。
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