色谱法,特别是高效液相色谱法(HPLC),多年来已被证明是一个非常宝贵的工具在分析实验室。食品分析、环境检测和药品安全、高效液相色谱法起着至关重要的作用。然而,尽管是一个“成熟”技术,仍有一些地区,证明有问题,导致次优的结果。
这样一个领域是在色谱过程中分析物的损失。这源于交互发生的样品中的分析物和金属表面之间的设备。,我们采访了阿米特·帕特尔金海恩斯凯丽史密斯和马丁•Gilar水公司的挑战在高效液相色谱分析物损失,它导致的安全问题和创新在这个空间是如何帮助克服这些问题。
问:分析物损失绑定和吸附在色谱分离分析物的高效液相色谱法分离以来的问题。这个问题对分析结果的影响是什么?
答:高效液相色谱的出现以来,我们已经看到许多先进的技术和方法策略降低金属表面吸附色谱的影响;一个共同的主题,许多产品目录和期刊文章的主题和常规实验室实践的焦点。非特异性分析物绑定和吸附导致恶化的峰形状和峰面积的损失在最好的情况下,而穷人assay-to-assay精度或全部损失峰值发生在最糟糕的情况下。此外,在不同程度上的色谱技术,放大了不定地有效的掩蔽实践阻碍的解释结果。
问:水做了应对这一挑战?
答:水域开发了一组技术,名为MaxPeak™高性能表面(HPS),目标是减轻损失样品分析物/表面相互作用。其中之一是一个混合有机-无机表面化学,帮助解决的挑战在液相色谱analyte-metal表面的相互作用。这项技术是基于一个ethylene-bridged硅氧烷化学。它的样品和金属表面之间形成一个屏障系统和列和减少金属吸附,提高再现性,简化方法开发和提高灵敏度和峰的形状。它也不需要表面钝化的过程去除金属离子自由通过酸处理等。新色谱柱和系统从水域MaxPeak HPS技术所有英超品牌。
问:什么是英超的差异或优势的解决方案,和其他的解决方案?
答:水的优势™ACQUITY总理™解决方案取决于我们选择比较。螯合剂的使用与移动阶段就是一个例子。其他的例子包括表面修整与重复样品注射占领活动网站在金属表面和样品衍生化改变分析物绕过静电相互作用。这些方法过程不必要的复杂分析通过引入额外的步骤流程。这些变通方案提供暂时的好处,介绍潜在的污染,在某些情况下导致离子抑制质分析。
除了方法论的替代品来抵消非特异性吸附,这一挑战的解决方案包括使用替代材料表面的色谱柱和系统组件。这些材料是聚醚醚酮(PEEK)。同时有效降低金属交互,PEEK仅限于低操作压力和由流动相溶剂肿胀像二甲亚砜(DMSO)和四氢呋喃(四氢呋喃)。
与水ACQUITY总理解决方案,可以得到从第一高峰和更大的峰容量注射没有复杂的分析与流动相添加剂如螯合剂或耗时的钝化和表面修整。
问:你能提供性能改进的几个例子吗?
答:ACQUITY总理解决方案旨在缓解问题的分析物/金属表面的相互作用在分析有机酸、有机磷酸酯类、寡核苷酸,此处则,酸性聚糖磷脂反相、亲水相互作用色谱法。
使用ACQUITY总理CSH Phenyl-Hexyl列相比传统CSH Phenyl-Hexyl列分析柠檬酸和异柠檬酸取得了明显更大的峰面积等效分析条件下(图1)。这些三羧酸(TCA)周期分析物含有羧酸盐根被绑定到金属。深刻的色谱性能差异时观察到这些交互是避免使用一个ACQUITY总理列。
图2: 酒吧情节显示性能的传统和ACQUITY总理列值前三个样品注射以及调节后500 pmol 15 35 mer oligodeoxythymidine标准,其次是10 pmol标准注入。样品注射2µL 10 pmol寡核苷酸标准注入列。在这些测量标准和使用的列ACQUITY总理版本的本·C18寡核苷酸(2.1 x 50毫米,1.7 米 米)。来源:水公司。
然而MaxPeak HPS技术的另一个好处是减少需要表面修整。从业者经常执行多个注射前的样本作为第一步的分析样本容易吸附于金属表面。如图2所示,传统列需要多个注入饱和活性吸附站点,实现样本信号一致。寡核苷酸属于一个类的分析物表面吸附会影响复苏和峰面积计算。我们证明了表面修整不需要实现可重复的信号在使用一个ACQUITY总理列代替传统的列。
问:你认为未来是什么样子的扩张这一技术?
答:液相色谱仪器和列是由金属大幅的负面影响峰形状,分析物恢复和再现性。的发病率和严重程度不受欢迎的绑定和吸附在化学测量是不可否认的和突出MaxPeak HPS的价值带给分离分析物复苏,assay-to-assay再现性,科学家更大程度的保证他们的定性和定量分析结果的完整性。
阿米特·帕特尔博士,资深科学家,金正日海恩斯,主要产品营销经理,克里•史密斯博士科学家马丁博士和Gilar原则,原则科学家,所有水域公司,凯伦管家博士说,高级科学技术网络作家。188金宝搏备用
