蛋白免疫印迹分子生物学的核心技术已经许多年了。然而,由于该技术的本质,协议可能需要艰苦的优化和即使这样,结果可能是高度可变的。当追求一致性和再现性,这样的问题可能是一个研究和发展的重要障碍。
许多年来,领导科学期刊发行新指导旨在提高数据的质量和再现性呈现在西方墨迹。随着自动化毛细管的引入西方墨点法这个目标现在看来似乎触手可及。
在2015年,我们见面功能性生物化学工厂在创建代谢和心血管疾病研究所(I2MC)在图卢兹,目的是提供最新的创新技术和技术支持功能的生物化学。特别关注了三大创新技术在自动化免疫印迹、均相时间分辨荧光(HTRF)介导的生物标志物的发现和细胞代谢的研究。工厂现在拥有80用户,包括在学术和私人研究合作。
最近,我们有幸与亚历山大·卢卡斯博士说,创始人和核心的经理我们见面设施,免疫印迹的自动化,自动从ProteinSimple SimpleWestern平台韦斯和杰斯Bio-Techne品牌,他们利用设施,这些进步正在研究的区别。
凯伦管家(KS):如何自动免疫印迹系统韦斯和杰斯传统的人工免疫印迹有何不同?
亚历山大·卢卡斯(AL):经典的西方墨点法是一种方法,改变了过去30年,除了电荷耦合器件(CCD)相机的出现取代autoradiographic电影。自动化的毛细管西方的到来是一个真正的技术飞跃。
事实上,这种方法原则上为我们保留不同免疫印迹的三大关键步骤:分离、固定化/传输和immunorevelation。但由于这些步骤自动化,我们获得重现性和可用性的时间给用户。此外,通过毛细血管可以显著降低所需的样本。
KS:抗体用于传统的系统可以用于自动化系统,还是需要专业的试剂?
艾尔:是的,没有任何问题。200抗体的开发平台上在过去的3年,只有10%的这些抗体不能被转移。
我们与所有现有的抗体供应商没有限制。设备所有试剂的灵活性允许我们优化每一步非常有效。有一个大型社区数据库可用所有的抗体验证用户。我们不需要任何专业的试剂。这是这一技术的巨大优势之一,一切都是开放的和可定制的!
KS:西方传统的屁股经常需要大量的优化生产优质污点。这是相同的自动免疫印迹系统,如杰斯吗?
艾尔:与西方传统的屁股一样,如果你想要一个高质量的量化,需要优化。主要的是可以测试的许多条件获得良好的线性度和饱和度条件只有1运行3小时25毛细血管。
你不能测试很多不同的条件在传统的免疫印迹,在很多场合,那些使用我们设备原有的意义“黄金标准”免疫印迹量化时,杰斯。
KS:自动免疫印迹如何帮助了你的研究?你能请告诉我们关于任何特定领域中,这种技术促进了工作那是不可能的吗?
艾尔:杰斯已经完全成为可能重新考虑研究所内的免疫印迹,也为各种企业在图卢兹地区。它帮助我们在很多项目中在心脏病学,神经科学,甚至新陈代谢和美容。再现性,少量的材料要求和其灵活性使我们进行大规模的临床研究,甚至产生免疫印迹蛋白质1 kDa 440 kDa。
亚历山大·卢卡斯博士凯伦管家博士,高级科学技术网络作家。188金宝搏备用
