如何优化临床前疫苗试验

如何引导

发布日期:2018年7月24日

好吧，这是你一直在等待的时刻——自你的科学生涯开始以来——你终于可以接种某种东西了。在实验室中花费的数百小时，甚至数千小时的时间，夜以继日和周末的时间来开发疫苗，确保它是针对你的抗原的，纯化它，观察引物，蛋白质，DNA, RNA，佐剂，最终都将在这个临床前试验中得到回报。你现在要向科学界，或者至少是你的首席研究员(PI)证明，你的疫苗在预防感染或针对癌症抗原方面是安全有效的。这种疫苗将改变你的研究方向，接下来它将用于非人类灵长类动物，在你知道之前，你将向机构审查委员会(IRB)提交申请，将其用于人类，然后你就解决了下一个大问题。否则疫苗将完全失败，接种疫苗的人将死亡，而未接种疫苗的人将存活，你必须从头开始——从第一天开始。不管怎样，你都很好。相信我，无论哪种方式，你都会获得一些非常有用的信息，这是事实。成功或失败将提供对疫苗、动物模型、疾病、免疫和疫苗策略的数百个方面的深入了解，您将节省下一组不必要的工作和基于您的研究的数百小时的试验和错误。所以，无论发生什么，你都是好的，你都在为特定疾病的知识库做出贡献。恭喜你!

主日历

我再怎么强调这一点也不为过。任何适当规模的疫苗试验，即使是不适当的规模，也可能变得非常快，换句话说，“主日历”不仅必不可少，它对研究的成功和研究人员的理智至关重要。保持日历简单，选择一个适用于所有实验室成员的日历，在实验室保留一个主日历(硬拷贝)，在实验室笔记本上保留一个版本，并确保所有成员都有一个数字或纸质副本。没有人应该说:“我不知道我今天要启动、接种疫苗、加强、挑战、收集样本。”只有一个人负责日历是个好主意，不管公平与否，这个人也是那个必须提醒其他人看日历的人，因为下周有事情要做。如果错过了某个时间点，未完成提升，或忘记对样本进行采样，则不能重复该时间点;它消失了，再也不会出现。免疫反应已经过了那个阶段，无法再恢复。错过约会会导致你的数据出现空白，你的图表会看起来很有趣，你的统计数据可能会出错，你必须在你的结果和讨论中解释它。每个时间点都有一个备份人员，如果有人生病或休假，他会进来照顾它。 To all others, you are all professionals, you are all busy, but everyone has made a commitment to the success of this study. Keep your version of the calendar up to date, set your own reminders and maybe you can be the one that no one ever has to remind!

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研究设计:时间和顺序非常重要，但通常是任意的

经常有人问我，在传染病研究中，我如何决定什么时候启动、接种、增强或挑战动物，或者在癌症疫苗研究中，什么时候植入肿瘤。我的回答是:“这完全是随意的”。你正在制定你的特定疫苗策略并进行这项研究，因为没有人知道它，你是那个想出最佳疫苗策略的人。所以经常没有“模板”可以遵循，你就是它。别慌，好消息是你可以从其他实验室的失败中汲取灵感。你所在领域的大多数疫苗试验都尝试了类似的东西，所以你的出发点是文献。在你的研究的这个时候，你应该对以前的研究非常熟悉，所以做出你认为会给你带来成功的必要的改变——从间隔疫苗时间线，增强，启动，或尽早挑战，或晚些植入。请记住，您所做的更改必须对动物(兽医疫苗)或人类切合实际。任何疫苗试验的目标都是有朝一日能用于动物或人类。对兽医来说，一个月给任何动物注射两次，而不是每隔8周注射一次，这现实吗? For humans, a prime and maybe a boost in six months is more realistic versus a prime and 2 boosts close together. In the case of cancer vaccines, since cancer progression is often aggressively fast, prime and boosts may need to be very close together, to give the cancer a one-two punch. It is important to keep in mind the end goal of your study, keep in mind the disease or condition you are fighting and the best way to beat it.

一开始就确定实验组和对照组

即使疫苗不能预防感染或减小肿瘤大小，也可以从试验中获得其他数据——疫苗是否具有免疫原性，反应是强还是弱，反应的广度是多少。是否有一些保护-它可能不能100%预防感染，但与对照相比有什么不同吗?与癌症疫苗一样，如果肿瘤没有完全消退，与未接种疫苗的动物相比，是否有显著的大小差异?如果有适当的实验组和对照组，就可以确定和分析这些参数和其他参数。与任何动物研究一样，重要的是使用尽可能少的数量来获得具有统计学意义的数据，并遵循联邦、州、地方和大学的所有协议和法规。在哺乳动物研究(猫)中，我只使用了N=6;多达N=15(小鼠)。如果有关于动物数量的问题，那么你必须确定对照组和实验组的重要性。

如果您必须省略一个特定的控制组，那么有必要考虑一下在没有该特定控制组的情况下如何解释结果的各种场景。对实验室来说，明智的做法是围坐在会议桌旁，吃着披萨和软饮料，在每个场景中都有或没有特定的对照组。在紧要关头，可以使用历史数据或对照组——前提是它已经被使用了很多次，这是一个“已知和接受的”组，这是一个罕见的情况，如果你的实验室有历史数据会更好。如果一个重要的对照组被排除在试验之外，来自试验组的结果可能不会显示对疫苗反应的相关性或差异。如果只有佐剂的对照组，或只有载体的对照组或无挑战的对照组缺失，如何比较接种组的疗效，这可能会使你在实验组中“看到”的任何结果无效。如果这是临床前疫苗试验的首次尝试，则使用已建立的动物模型。

试剂。这似乎是显而易见的，但要确保你有足够的试剂，尤其是疫苗

如果你从一家公司或另一个实验室获得疫苗，必须来自同一批次。如果你正在制作自己的疫苗，尽量为整个研究制作足够的疫苗，我知道由于“新鲜度因素”，这并不总是可能的，但你可以确保你使用的是相同的疫苗抗原储备——制作足够的疫苗冷冻起来，如果需要的话，可以用来制作额外的疫苗。尽量获得足够的检测试剂，特别是如果使用相同批次的试剂盒，如果没有，必须注意每次使用不同批次的任何试剂。最后，尝试额外的东西，管子掉下来，动物移动(意味着你用针没有击中目标)，冰柜坏了。尽你所能确保你有备份，这将消除试剂出现问题时的压力和恐慌。

文档非常重要

写下每一件事，即使它看起来对研究无关紧要，直到你开始分析数据，你才会知道它是否重要。不要只是写下数据和观察结果，讲一个故事，一个叙述，这样当你或其他人回到你的笔记本上时，他们就可以跟着你的故事走，也许还能知道你为什么做出某些选择和决定，为什么你选择某些分析或试剂，等等。因此，轮子不必重新发明，过去的错误也不会重演。

在任何情况下都不要改变研究方案

你开始使用的方案是你的实验室设计的最好的方案，所以一旦试验开始，你就不能做任何改变。即使你观察到你的动物死亡，病情加重，研究也没有按照你的想法进行，即使你认为这是一个巨大的失败，也不要做出任何改变。即使试验失败了，这是有可能的，你从这项研究中得到的任何信息对下一次研究都是非常重要的，或者对免疫原性，疗效，毒性，剂量反应，生物标志物，主要和次要终点，等等。当然，有时会错过时间点，注射了太多剂量，或者忘记了什么，我们是人，这是会发生的。在这些情况下，记录所有事情，发生了什么，对哪个群体，你是否试图“修复”它，如何以及为什么，你决定让它顺其自然?意外发生时，记录一切，但不要故意改变研究——以适应你预想的结果，资助人或资助人的目标。不要成为“那个”实验室，因为“意外”而必须做出“改变”的实验室，这只会让你看起来草率和不专业。