用分子器件微板荧光计测定活细胞中的蛋白酶体抑制

真核细胞内的蛋白质处于动态状态，在合成和降解之间保持高度调节的平衡。尽管经过几十年的研究，人们对蛋白质合成已经有了很好的了解，但我们对蛋白质降解的认识只是在最近20年才有了重大进展。因此，2004年诺贝尔化学奖授予了Aron Ciechanover, Avram Hershko和Irwin Rose，以表彰他们发现了泛素介导的蛋白质水解，这是一种依赖于atp的过程，其中不需要的蛋白质被泛素(一种76个氨基酸的蛋白质)复制标记然后，标记的蛋白质被运输到蛋白酶体进行降解。蛋白酶体是所有真核细胞(和一些细菌)内的一个巨大的(2.5 MDa)桶状蛋白质复合物，由两端有帽的隧道状核心组成。(参见图1。)caps(调节复合物)识别并结合目标蛋白，并将其注入到中央核心，在那里蛋白质依次降解为短肽。该应用说明表明，蛋白酶体活性的抑制可以很容易地测量使用分子设备微板荧光计。