十年的DNA聚合酶技术的创新

热科学Phusion高保真DNA聚合酶目前庆祝10周年。我利用这个机会赶上热费希尔科学更多地了解这些高保真DNA聚合酶。

AB:为我们的读者,可能没有听说过Phusion名字,你能告诉我更多关于这个范围?

Fisher热:十年前在芬兰一个团队成功开发一个非常健壮的DNA聚合酶,一个50倍的错误率低于传统Taq聚合酶。酶,它是基于独特的融合蛋白技术,开发以提高PCR效率,找到一个解决几个PCR的局限性。融合蛋白技术是由两个组成部分融合在一起,持续因素(高温、非特异性双链DNA结合蛋白)和校对DNA聚合酶。除了可靠读取长度的增长预期,这PCR酶表现出其他一些可取的特性,包括增加忠诚(52 x /TaqDNA聚合酶),抵抗各种PCR抑制剂和更快的整体性能。酶使许多PCR的简化应用程序和今天仍然领导高保真PCR市场。

过去十年Phusion产品家族已发展到包括独立的酶,主人的混合和热态启动酶,所有可见的绿色缓冲,使反应产物的直接加载到凝胶。这些融合酶使建立一个直接PCR协议,用户不净化DNA;这意味着样品(植物、动物组织或血液)可以直接放置到扩增的PCR混合。

阿瑟:什么关键特性Phusion提供研究人员?

Fisher热:

•极高的忠诚- 52 x倍常用TaqDNA聚合酶。这允许研究人员生成PCR产品很低的顺序错误的机会。
•长期扩增子——持续合成的酶使一代的更高的产品20 kb。
•快速放大——允许用户大大减少PCR循环时间
•抗抑制剂——允许用户甚至放大模板理想的纯洁

阿瑟:启用了Phusion任何显著的研究?

Fisher热:Phusion旨在精简放大过程,有效地减少序列错误的数量和工作具有挑战性的模板。Phusion通常是利用协议的优化和发展阶段,而不是在新方法发展的开始。然而,有大量的团体使用Phusion来完成他们的初始项目,因为他们无法获得必要的技术水平与标准聚合酶的敏感性。事实上,我们高兴地看到,我们的高保真Phusion酶使一种喜气洋洋的技术的发展,一个团队在Inostics。这种技术的独特之处在于,它允许罕见突变的敏感检测ctDNA并促进癌症研究和诊断。

阿瑟:你最近扩大了范围的发射Phusion绿色高保真DNA聚合酶,本产品补充现有的范围如何?

Fisher热:越来越多的客户正在寻找时间,材料和节约成本在每一步的工作流。为了帮助研究人员实现这些储蓄,我们提供Phusion产品一个包含追踪染料和电泳缓冲溶液密度试剂。这使我们的客户能够把许多步骤从他们的工作流程,如需要购买染料及其后续使用移液步骤运行凝胶前。简而言之,PCR产品可以直接加载到一个循环后凝胶。我们的客户喜欢。

阿瑟:最后你能告诉我更多关于傅真正的适用于Phusion吗?

Fisher热:Phusion DNA聚合酶,与所有其他校对酶,不宽容的dUTP,后一个不自然的DNA核苷酸出现在某些程序比如亚硫酸氢盐转换。因此我们的一些客户将受益于Phusion U,新的变异版本的Phusion将很快推出。Phusion U将能够容忍dUTP DNA模板,以及能够将dUTP使用UDG延续污染等技术。

即使没有额外的增强,新客户继续使用Phusion高保真DNA聚合酶在他们的新的应用程序。我们相信我们的Phusion技术将在未来许多年的需求。

更多信息Phusion高保真DNA聚合酶和Phusion节日可以通过访问www.thermoscientific.com/phusion

热费希尔说阿什利董事会,管理编辑技术网络。188金宝搏备用你可以找到阿什利Google +并遵循技术网络188金宝搏备用推特。