解决AAV生产的挑战
腺相关病毒(AAV)载体是一个多才多艺的和吸引人的基因疗法交付平台,针对广泛的细胞类型的能力。然而,AAV必须在生活生产系统,迄今为止,问题可伸缩性和高生产成本有限的技术的广泛采用。
188金宝搏备用跟艾米丽Jackson-Holmes博士,助理产品经理,热费希尔科学,学习更多关于AAV载体的好处和使用它们的兴趣增长的理由。在这次采访中,Jackson-Holmes也解释了如何Gibco™AAV-MAX生产系统可以帮助克服挑战与AAV生产和确保法规遵从性。
安娜·麦克唐纳(AM):为什么有那么多兴趣AAV载体吗?是什么让他们的理想选择基因疗法的交货吗?
艾米丽Jackson-Holmes (EJ):AAV向量是一个有吸引力的和广泛的追求选择基因治疗,由三个批准证明基因疗法(Luxturna、Zolgensma Glybera *)和许多其他的发展。具体地说,为在活的有机体内交付的基因疗法,AAV载体用于以下几个原因。自AAV non-integrating,它是优于慢病毒(LV)在活的有机体内基因治疗的应用程序,它还具有低免疫原性。此外,不仅可以AAV转导分裂和非区分细胞,但它可以针对特定的细胞和组织类型通过不同的天然和合成或混合血清型。
问:什么是制造AAV载体时遇到的一些主要挑战?
EJ:效率、成本和可伸缩性一直在该领域的重大挑战。低生产率更是一个挑战在考虑治疗疾病所需的大量的病毒载体与大的患者群体。传统上,对AAV在哺乳动物细胞生产,adhered-based HEK293系统已经使用。这些需要扩展,以扩大生产的病毒载体,进而需要占用大量的空间。HEK293细胞的悬浮适应使得suspension-based生产AAV的实现,哪个更适合扩展。最后,另一个关键的挑战是缺乏定制和regulatory-compliant试剂,使商业化的道路。这样的例子包括使用细胞含有致癌SV40大T抗原和血清试剂的使用,都存在安全隐患。
问:转染的方法最常用的是哪一个?瞬时转染的优势是什么?
EJ:最常见的方法生产AAV在HEK293细胞瞬时转染质粒DNA。与helper-free瞬时转染具体地说,与三个质粒转染细胞提供代表和帽基因,转基因和基因提供辅助病毒的功能。使用瞬时转染是通用性的关键优势和速度。
问:你能告诉我们更多关于Gibco AAV-MAX生产系统以及它如何帮助解决的挑战AAV生产?
EJ:AAV-MAX系统是一个完整的suspension-based AAV生产系统。通过高密度悬浮培养系统达到高AAV浓度293 f-derived克隆细胞系的化学定义,无动物源培养基。Helper-free三重转染执行使用脂质纳米粒转染试剂和小说生产增强剂。每个组件的系统优化的共同努力来实现高滴度的简化工作流程,消除了需要优化试剂和协议。使系统用户能够轻松地从研究使用临床和商业使用,该系统旨在规模从摇动烧瓶到生物反应器,和试剂定制和监管的。
问:AAV-MAX系统试剂动物源免费。为什么这个很重要?
EJ:在基因治疗领域,速度是非常重要的。的一个关键方面是确保AAV生产系统最初用于研究阶段选择与临床和商业用途,包括试剂的选择监管友好。动物源免费试剂的使用可以减少病毒污染物的风险以及减少批次的变化。
我:细胞和基因治疗开发者面临的监管问题?AAV-MAX生产系统如何处理这些吗?
EJ:正如已经提到的,定制的选择和regulatory-friendly试剂确保平稳过渡到临床和商业生产。AAV-MAX系统使用克隆HEK293细胞行缺乏T抗原,包括所有动物源免费试剂。此外,补充我们的现有研究仅使用(RUO) AAV-MAX系统,我们将推出Gibco™细胞疗法系统(CTS™)版本AAV-MAX明年。我们的CTS版本提供了一个记录的细胞系,GMP-grade试剂,广泛的安全测试,和管理文档。这些帮助基因疗法开发人员减少风险和支持他们的监管备案文件。
艾米丽Jackson-Holmes安娜·麦克唐纳说,科学技术网络作家。188金宝搏备用
