高通量蛋白质定量流程优化

快速、准确和具有成本效益的定量的单克隆抗体(mab)对生物工艺至关重要。目前有超过140个马伯FDA批准的biotherapeutic代理、代表最快速增长的一类新药。尽管下游加工技术的进步,亲和纯化的单克隆抗体使用蛋白质色谱法仍然是主要利用。

使用蛋白树脂尽可能有效负载树脂接近是很重要的动态绑定能力(DBC)。DBC通常是确定与小卷状的扩大过程之前的水平。笼罩在生命科学研究的科学家们停留时间的影响,和马伯浓度蛋白质动态绑定能力。DBC的知识在这些条件下允许他们强劲扩大的过程,同时保持较高的树脂的生产力。

测量蛋白质的DBC马伯,原料是加载到列直到结合位点成为饱和和抗体产品开始泄漏。污染物的蛋白质在曹原料有很大的吸光度,是不可能准确地确定使用紫外线A280马伯的突破。遵循抗体突破,分数列flowthrough收集,分析的样品蛋白质的高效液相色谱法和一个•比奥雷的绯闻干涉法(BLI)测定。

后者使用缝匠肌八隅体®R8 BLI系统。分析方法是使用几个指标包括过程时间相比,准备时间,每样品成本,动态范围、精度、准确性,检测极限(LoD)和定量限度(定量限)。结果证实,八隅体®BLI系统提供一种快速、准确、经济的手段量化单克隆抗体,并减少开发工作过程。