简单的抗体标签

直接抗体标记可能是一个困难和耗时的过程。我们与Innova Biosciences的营销经理Klaudyna Schmidt进行了交谈，以了解新的Lightning-Link®Rapid系列如何简化和加快这一过程。

AM:间接抗体标记和直接抗体标记的区别是什么?

KS:直接抗体标记和间接抗体标记的主要区别在于，检测方法中使用的标签是直接附着在检测抗原的一抗上，还是偶联到与未标记的一抗结合的二抗上。

直接标记一抗有许多优点，例如需要更少的试剂，消除跨物种反应性和非特异性结合，以及明显更简单和更快的检测方案，避免了多个标记步骤的需要。

AM:你能描述一些传统的直接抗体标记方法吗?

KS:传统上，直接抗体标记被认为是复杂和耗时的，只有那些具有化学修饰技术专业知识的人才能进行。

传统的偶联方法多种多样，这在很大程度上取决于附着在抗体上的标签的性质。连接大型荧光蛋白或酶的方法特别复杂，通常需要对标签和抗体进行化学修饰。较小的荧光分子通常使用nhs -酯化学方法与抗体相连接，尽管这有点简单，但仍然需要了解所涉及的化学过程和可能影响偶联效率的因素。

传统抗体标记的一个共同特点是需要将标记抗体从游离染料中分离出来，这一步骤会导致高价值抗体的显著损失。

AM: Lightning-Link®Rapid如何简化标签流程?

KS: Lightning-Link技术可以在20分钟内直接标记抗体、蛋白质和多肽或任何带有胺基的生物分子，操作时间仅为30秒。

研究人员只需要将他们的生物分子移液到一个冻干的Lightning-Link混合物小瓶中，并孵育15分钟。因此，不需要专业知识，实际上任何人只要会使用移液管就可以成功地标记自己的一抗。

此外，与其他声称快速标记的系统相反，研究人员不需要将他们的抗体发送给试剂盒制造商提前修改。

AM: Lightning-Link®Rapid还提供哪些其他好处?

KS:使用Lightning-Link快速试剂盒的主要好处之一，除了明显的简单和高效之外，是在实际使用抗体的检测中省去了额外的清洗和分离步骤，这可能既繁琐又耗时。令人惊讶的是，有多少次人们表示他们是多么讨厌这些洗涤步骤!与我们交谈过的许多研究人员也强调，在他们的试验中不使用二抗是一种有吸引力的节省时间的方法。

此外，间接试验中二抗和一抗之间形成的较弱的非共价键可能导致在所需的额外洗涤步骤中低亲和力抗体的丢失。这就是二抗染色通常预期的扩增在实践中并不总是可见的根本原因。

直接分析还避免了与间接标记相关的跨物种反应性和非特异性结合问题，这些问题会使数据解释变得困难甚至不可能。

AM:与传统方法相比，结果如何?反馈如何?

KS:尽管看似简单，Lightning-Link®过程是复杂的，并产生的共轭物具有相同的性能特征，甚至比那些用费力的多步共轭程序制备的共轭物更好。

最初的Lightning-Link系列于2006年推出，从那时起就收到了大量的积极反馈。现在有近400篇发表的参考文献引用了套件在广泛应用中的使用，还有许多像下面这样的奖状。

“Innova的产品给我们留下了深刻的印象。他们的生物素试剂盒使用简单，而且被证明比许多竞争对手的试剂盒更耐用，自从我们开始定期使用它们以来，我们已经看到了再现性的显著改善。我们期待继续与Lightning-Link®技术合作。”

Jake Micallef博士，VolitionRx的首席技术官

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克劳迪娜·施密特接受了科技网络编辑安娜-玛丽·麦克唐纳的采访。188金宝搏备用