一个抗肿瘤抗体反应减弱转移性黑色素瘤小鼠模型

建立小鼠黑色素瘤模型,0.5 x105 C57BL / 6-derived B16转椅黑色素瘤细胞表达卵子通过尾静脉注射到野生型C57BL / 6小鼠。24 h后小鼠注射5或4 x106 x105 MHC II级不匹配的CD4 (+) t细胞从bm12老鼠。bm12小鼠C57BL / 6,港口H2-Ab1bm12等位基因的突变导致妇幼保健二类等位基因变体。从小鼠脾脏CD4 T细胞分离使用mac与积极的选择(Miltenyi)分离。控制包括没有注入和自体的细胞转移。组成的两个独立的实验小鼠5或10每控制或治疗手臂。老鼠牺牲在第十天或一天20后对肿瘤细胞转移和影响被计数测量肺转移负担。血清抗体反应测定使用一种间接ELISA特有的卵子(Chondrex工具包# 3011)。在脾脏生发中心计算使用免疫组织化学和荧光标记抗体GL7,生发中心标记和B220, b细胞标记。

两个独立的实验显示显著降低肺转移相比,控制(n = 10,意味着满足计数;14.6和32.2,p = 0.02)和(n = 20,意味着满足计数;13.5和28.8,p = 0.01)在第十天的帖子细胞过继转移x106 4或5 x105细胞。也有统计上显著降低肺转移相比,自体细胞传输控制(n = 20,意味着满足计数;13.5和27.9,p = 0.008)当5 x105细胞被使用。血清anti-OVA抗体水平的提高在这两个实验。然而,只有实验使用5 x105细胞表现出显著的增加相比,没有细胞转移控制(n = 20,意思是浓缩的。ng / mL, 15.25和2.78,p = 0.0003),自体的细胞转移控制(n = 20,意思是浓缩的。ng / mL, 15.25和0.05,p < 0.0001)。符合这个观察是发现次级卵泡的频率统计上显著增加自体的细胞相比,传输控制(n = 20,意味着%次级卵泡的频率/总毛囊; 69% vs. 14%, p<0.0001). In contrast, pulmonary metastasis was identical in all arms when analyzed at day 20 post adoptive cell transfer.

这些初步结果显示抗肿瘤活性细胞过继转移MHC类的不匹配的CD4 (+) t细胞。减少数量的发现肺转移与增加血清anti-OVA免疫球蛋白和增加脾脏生发中心发展。有趣的是,使用一个八更多的MHC类不匹配的CD4 (+) t细胞并没有导致显著增加血清卵子特定的免疫球蛋白。进一步的研究需要进一步描述这种抗肿瘤抗体反应诱导的细胞过继转移MHC类不匹配的CD4 (+) t细胞。为此实验4倍目前正在使用肿瘤负担。