描述GPCR激活使用自动活细胞成像

G蛋白偶联受体(GPCR)介导的通路是细胞应对的关键细胞间和环境线索,和药物发现工作是一个主要的重点,特别是对于癌症治疗。激活GPCRs分子,产生的信号级联触发相关的G蛋白,是不同的。荧光染料和生物传感器可用于监测第二信使水平变化,包括Ca2 +和环腺苷酸(cAMP),以应对GPCR激活。在这里,我们描述一个基于活细胞成像的方法来检测GPCR激活使用狮心王™外汇自动活细胞成像和Gen5™标和成像软件。这种方法提供了一个大型试验窗口和提高灵敏度的方法依赖于总荧光强度测量。双列直插式分配技巧使GPCR受体激动剂的细胞反应的连续监测。此外,一个图像的捕获率每秒20帧使快速GPCR动力学的特征。