伦敦CRUK研究所的科学家们使用Linkam CMS196
Linkam科学仪器已报告的使用他们的创新CMS196低温阶段研究哺乳动物细胞在伦敦研究所,英国癌症研究。
对哺乳动物细胞保持在一个健康的状态,他们需要不断更新自己的组件。处理旧的组件的过程被称为“自噬”,这源于希腊词汽车“自我”和phagein“吃”。
这个过程涉及到一个双层膜结构被称为自噬小体的形成,旧吞没或功能失调的细胞器,然后与溶酶体融合,它们分解回收的组分分子。
自噬是细胞饥饿时增加,起着重要的作用在许多细胞过程,包括开发、免疫、神经退化和癌症。
在最近发表在《华尔街日报》,Ultramicroscopy(杜克et al ., 2013),露西博士柯林森(LRI电镜单位),与博士沙龙合作Tooze (LRI分泌通路实验室),成像形成自噬体在整个哺乳动物细胞。
结构尤其难以捕获细胞准备电子显微镜,所以他们现在使用一个强大的新技术叫做cryo-soft x射线断层扫描,cryo-SXT,莉斯博士与杜克在钻石光源同步。
这使得整个哺乳动物细胞成像尽可能接近的生活状态。细胞生长在小黄金网格和陷入液态乙烷保护细胞在冷冻状态。
为了发现细胞内的自噬小体,它们与绿色荧光蛋白(GFP)标记。然后荧光自噬小体位于使用一种名为相关cryo-fluorescence和cryo-soft x射线显微技术(cryo-CLXM)。
执行Cryo-fluorescence显微镜使用Linkam CMS196阶段细胞在运输前cryo-containers同步加速器在牛津郡,柏林和巴塞罗那成像。这个新的相关方法的主要优势之一是CMS196阶段允许细胞质量的筛选和蛋白质定位的研究实验室在实际旅行之前同步加速器,在成本和效率是至关重要的。
的组合cryo-fluorescence显微镜和cryo-SXT允许科学家链接蛋白质天然态附近结构的功能。这应该得到广泛应用于细胞生物学对健康和疾病的研究。
的Linkam CMS196阶段是专门解决这个问题如何让玻化EM网格的荧光显微镜通过冷凝cryo-TEM没有使不透明和污染。舞台已经优化的光,使高NA镜头的使用。
3网格可以装入一个特制的磁带运输从跳水冰箱直立荧光显微镜。磁带是那么容易装上观看大桥使用特殊的操作工具。
下面的示例查看室是完全干燥和-180ºC,而样本桥本身是在-196°C。网格可以快速高效地扫描使用100 x 0.75 na镜头使用高精度微米和操纵。然后简单地操纵盒回运输设备,然后运往cryo-TEM在液氮中。