无标签,实时活细胞分析球体:IncuCyte®亮场分析
越来越多的证据表明,与二维单层细胞模型相比,可以使用微组织和类器官进行更相关和转化的观察。这在癌症生物学和肝毒性领域最为显著。例如,与2D培养相比,肿瘤球体表现出更相关的形态和增加的细胞存活率,并且具有低氧核心。目前评估肿瘤球体生长和收缩的方法受到以下一个或多个因素的限制:(1)耗时、昂贵或费力的检测工作流程,(2)需要标记细胞(例如荧光探针),这可能会扰乱生物学,可能不适合初级组织,(3)单个时间点读数不能报告完整的时间过程,(4)间接读数(例如ATP)可能忽略有价值的形态学洞察和/或错误报告细胞生长。
在本应用说明中,我们描述了基于IncuCyte®S3 spheroid软件模块执行的无创亮场图像分析的小型化(96/384孔)活细胞肿瘤球体分析的方法和验证数据。在超低附着(ULA)板中形成肿瘤球体,并监测其大小和形态长达2周。这些检测方法灵活,操作简单,可实时自动直接测量肿瘤大小。
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