用于询问GPCRs的活细胞生物传感器检测-生物传感器变体的比较分析

功能性的、基于细胞的检测对于识别GPCRs的调节剂至关重要，包括那些通过cAMP的增加或减少发出信号的调节剂。之前，我们演示了Promega公司的GloSensorTM cAMP检测的自动化，该检测利用了活细胞生物传感器，该传感器由cAMP结合域融合到萤火虫荧光素酶的圆形排列形式。在与cAMP结合后，所表达传感器的构象变化导致衬底存在时光输出的增加。生物传感器的几种变体对cAMP具有不同的亲和性，一些提供了更高的灵敏度，另一些提供了更高的动态范围。具有最宽动态范围的传感器22F对cAMP的亲和力最低，在特定条件下，该结构的基础信号可能难以检测到。

本应用笔记比较了使用自动化方法的最高和最低亲和变量的性能和HTS微孔板阅读器的高灵敏底部读取能力。