当涉及到生命科学进行实验室研究,科学家必须创造适当的条件,以适应生存和/或活细胞的增长。
细胞培养需要特定的环境条件。最佳生长和增殖,细胞需要:
- 温度控制
- 合适的pH值和同渗重摩
- 细胞附着生长的基质
- 一种特定的培养基
- 孵化器保持稳定的条件
本文将深入研究这些关键组件之一:细胞培养基。我们将解释细胞培养基是什么,什么是它的组件,不同类型,寻找在选择一个合适的细胞培养基。
细胞培养的媒体是什么?
细胞培养基增长,也被称为媒体,是一个总括的术语,它包括创建的任何凝胶或液体在人造环境中支持细胞增长。
当科学家把细胞、器官或组织从生物,他们必须保持在一个适当的人工环境。文化中扮演不可或缺的角色在细胞培养技术,支持体外细胞研究。
是介质供应所需的营养细胞培养生存和增殖。增长的媒体还提供了正确的同渗重摩和pH值。
科学家必须考虑他们的细胞类型时,选择一个适当的生长介质。有各种不同的类型的细胞培养基适应从哺乳动物细胞,植物,昆虫、细菌、酵母、病毒等等。
细胞培养基的选择直接影响实验的结果,这样,必须仔细考虑。
细胞培养基的成分是什么?
细胞培养媒体组成的化合物和营养支持细胞的增长。常见的细胞培养基的组成部分包括:
- 氨基酸:每一个细胞培养基含有氨基酸、蛋白质的基石。至关重要的和不重要的氨基酸可以用来刺激细胞生存和增长。
- 维生素包括:维生素促进细胞生长和增殖。血清作为许多在媒体血清维生素的来源,但维生素无血清培养系统必须添加到媒体。
- 碳水化合物:碳水化合物提供活细胞的能量来源。葡萄糖是常用的,但其他碳水化合物,如半乳糖,果糖,麦芽糖,是可用的。
- 无机盐需要:无机盐来调节膜电位和同渗重摩。
- 基本和微量元素:细胞需要元素如铁、钾、镁、锌生长。
- 血清:血清含有生长因子抑制剂、激素、蛋白酶抑制剂、螯合剂、氨基酸、碳水化合物、脂类、维生素、微量元素、矿物质,更需要细胞的增长。牛血清是常用的。
- 激素:某些激素可能被添加到影响细胞功能,生长和扩散。
- 缓冲系统:缓冲系统调节pH值。
- 补充:补充激素、酶抑制剂和微量元素有时被添加到细胞培养媒体迎合程控和研究目标。
- 抗生素:抗生素添加到细胞培养基抑制真菌和细菌生长。抗生素是最适合血清媒体由于蛋白质绑定一些抗生素的负载。相比之下,细胞在无血清媒体抗生素毒性更大的机会。
不同类型的细胞培养基是什么?
细胞培养基可以分为两个主要类别:自然媒体和合成。
自然的媒体
自然的媒体是那些来自组织提取或动物体液,如血浆、淋巴、血清。自然媒体可以分为三组:
- 生物体液:例子包括血清、血浆、淋巴和羊水。
- 组织中提取:骨髓的例子包括胚胎肿瘤和肝提取物。
- 凝块或凝结剂:例子包括血浆凝块和凝聚剂。
是最常见的自然血清培养基。在合成培养基血清甚至作为补充的文化。牛血清是受欢迎的由于众多的优势,包括充足的资源和长时间的应用程序。
合成媒体
合成媒体(也称为人工媒体)是创建使用各种有机和无机化合物。合成媒体包括:
- 血清媒体使用:合成媒体补充血清。
- 无血清的媒体:无血清媒体(SFM)比血清媒体提供更大的一致性,让研究人员支持细胞生长和增殖而不需要血清。
- 化学定义媒体:化学定义的媒体3组成的,只有净化有机和无机成分。
- 无蛋白媒体不包含:无蛋白培养基的蛋白质。蛋白质补充剂可以根据需要添加。
- 平衡盐溶液(BSS)自己:BSS用于保持细胞存活。BSS富含营养物质和其他化合物创建文化媒体能够支持细胞生长和增殖。因此,BSS形成许多类型的复杂的媒体的基础。
无血清媒体(SFM)通常分为基本/基底或复杂。基底介质是那些没有补充。一旦增长补充添加到基础培养基,它变成了一个复杂的媒介。
下面是一些常见的培养基的列表。
| 媒体名称 | 媒体类型 | 描述 |
| MEM(最低基本培养基) |
基媒体 | 也被称为鹰的最小基本培养基(EMEM),这种介质用于小学和二倍体的文化。微机电系统只包含维生素、非必需氨基酸、无机盐、谷氨酰胺。 |
| DMEM(杜尔贝科修改鹰的介质) |
基媒体 |
MEM相似,但与额外的氨基酸和维生素。不含生长促进剂和蛋白质。 |
| IMDM (Iscove修改杜尔贝科的介质) |
复杂的媒体 | 一个修改版的DMEM更多的氨基酸和维生素。它不包含铁但有硒和硝酸铁。适用于高密度的文化。 |
| rpmi - 1640 |
复杂的媒体 |
媒介是适用于大多数的哺乳动物细胞类型。最常用的手段之一。 |
| 火腿的不会和F-12 |
无血清的媒体 | 火腿的不会是原来的火腿营养混合物,设计用于与中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。它适合使用人类二倍体细胞。火腿的F-12更复杂,适合于大鼠前列腺上皮细胞和大鼠肝细胞细胞。 |
寻找在细胞培养媒体
最重要的一步是确定什么类型的细胞培养基使用。有如此多的商业媒介,找到正确的选择,则可能让人生畏。
首先研究细胞系您将使用来确定不同的文化媒介。您可能会选择一些,试一试看看效果最好。这里有一些因素需要考虑。
1。媒体的准备
细胞培养基品种进来三种形式:
1。粉中:媒体是最便宜的但必须消毒粉,由研究员。
2。集中的媒介:集中媒体只需要被稀释的研究员。
3所示。工作方案:解决方案是最简单的类型的媒体工作。他们是设计用于没有任何操作的研究员。
2。使用的媒体类型:天然和合成媒体
所有细胞培养媒体属于两类之一:自然媒体或合成。每个都有自己的优点和缺点,直接调查人员中选择。
血清媒体是由把hemaleucin从等离子体。由此产生的混合物包含组件的组合是有价值的对细胞生长和增殖。他们的血清媒体的好处包括:
- 由多种细胞营养物质,如氨基酸、维生素、矿物质和脂肪酸。
- 提供组件,允许细胞粘附。
- 含有多种生长因子和激素。
但也有一些缺点,血清媒体。其缺点时,血清媒体:
- 缺少成分均匀性,使其不适合大规模的实验。
- 包含化合物的混合物,其中一些是有害的或抑制某些细胞的生长。
- 有更大的风险污染相比人工媒体。
- 可能使细胞培养产品的隔离。
- 可以是昂贵的。
合成媒体一致性的明显的优势。调查人员可以确定他们使用相同的培养基,即使年代卡尔他们的研究。此外,人工媒体通常比是更便宜的媒体。
然而,有缺点使用无血清培养基。这些文化更敏感的极端,其中包括温度、pH值、同渗重摩。
3所示。使用哪一个特定的媒介
一旦你选择了自然和人工媒体,必须选择一个特定的媒介。许多实验室利用商业媒体,允许用最少的工作质量和一致性。
为了找到最好的一个,你必须问你自己:
- 你会使用什么类型的细胞,和他们的需求是什么?
- 实验室的能力和局限性是什么?
- 实验的目的是什么?
例如,干细胞需要媒体可以方便维护、分化、扩张,和下游应用程序。因为干细胞是多能,媒体条件必须密切监测,调查人员并没有得到其他比他们的目标。有一些商业媒体设计用于与干细胞,如rpmi - 1640,工作和某些类型的干细胞。
如果你不确定这中是最好的,媒体公司可以帮助你缩小你的选择范围。确保你理解你的细胞,目标,和实验室规范,选择最适合的。
