PNAS文章验证BioMark™数字阵列用于从单个干细胞分析转录因子
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研究发表于美国国家科学院院刊表明BioMark™数字阵列,结合PCR技术,为基因调控网络的研究提供了一种新的工具。
在这项研究中,数字阵列被用于在每个细胞的绝对拷贝基础上量化基因,从小鼠骨髓中提取的五类造血干细胞前体。
结果表明,常见髓系祖细胞的基因表达模式存在差异,家政转录本GAPDH存在显著差异。
这种分歧强调了测量单细胞转录本的必要性,以便清楚地了解细胞编程。
“我们相信数字阵列技术将对干细胞研究的步伐产生重大影响,”该报告的作者之一、斯坦福医学院弗吉尼亚和路德维希癌症研究临床调查教授、干细胞生物学和再生医学研究所所长欧文·韦斯曼博士说。
数字阵列有可能克服在微孔板平台上实施PCR分析所固有的困难。
传统的mRNA检测涉及对大量细胞的聚合测量,这可以掩盖决定细胞命运的关键调节状态。
另一方面,数字阵列用于分析单个细胞。它的工作原理是将样品和检测成分的混合物分配到大约1000纳米体积的反应室中。
芯片的结构,以及适当稀释样品的加载,确保每个腔室包含一个或没有拷贝的目标基因(cDNA)。
在芯片热循环之后,只有基因阳性的腔室才会发出荧光信号,这使得特定细胞的拷贝数能够被准确计数——即数字PCR。
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