识别的基因参与细胞周期调控使用排列合成CRISPR RNA库多参数高含量测定

在这里,我们使用一个细胞周期记者细胞系进行排列,合成crRNA: tracrRNA屏幕锁定169个基因有四个crRNAs每个基因高内容分析(HCA)来识别基因调节细胞周期。多个参数被用来分类细胞不同的细胞周期的细胞状态和阶段:细胞形状不规则的原子核,G1期细胞,细胞在年代或G2期,细胞在有丝分裂或染色质浓缩,细胞和多核DNA组件。我们使用一种新的统计方法识别和应用多种策略包括基因表达分析、基因插入和删除的确认和验证通过正交试剂来识别高信心与角色在细胞周期调控目标基因。最打击有多积极crRNAs /目标基因,使目标基因的识别与高信心,展示的力量合成crRNAs库结合HCA化验在筛查复杂细胞表型的排列格式。考虑到易于使转染rna在大多数细胞类型,我们预计许多表型分析适合排列与合成crRNA库筛选。