iPSC-Derived心肌细胞和荧光素酶记者:一个健壮的报告监测心脏保护的平台和途径在内源性人体组织细胞生物学

病理生理条件、医疗干预和不相干的毒性都能导致细胞氧化应激。在心脏细胞,延长和/或过度氧化应激可以导致毒性:发育迟缓的主要原因,黑盒警告,和发射后撤回药品。许多保护性反应氧化应激介导的转录水平通过抗氧化反应元素(战神)。iCell®心肌细胞(细胞动力学国际)是全功能的心肌细胞来源于人类诱导多能干细胞(万能)。监控活动相关的能力组织细胞将提供一个非常好的工具询问和增强心血管过程通过基础实验和筛选范式,分别。为此,小说是荧光素酶记者构造,pGL4 [luc2P / NRF2 / Hygro] (ARE-luc: Promega)是暂时性的转染到iCell心肌细胞和功能验证通过诱导氧化应激的应用叔丁基氢醌(特丁基对苯二酚)和监测荧光素酶活性的增加。用GFP证明lipid-based控制实验方法可以引入质粒进入终末分化iCell心肌细胞转染效率大于40%以最小的优化。转染的ARE-luc iCell心肌细胞和随后的孵化与特丁基对苯二酚生产增加荧光素酶活性以剂量依赖的方式。同样,luciferase-based CRE和NFAT记者充当代孕读出的GPCR调制产生剂量依赖性增加荧光素酶活性在转染到iCell心肌细胞和异丙肾上腺素刺激。在一起,这些数据表明,各种luciferase-based记者很容易转染到iCell心肌细胞。 The combination of a nearly-limitless supply of relevant human tissue cells and a robust reporter system promises great utility for pathway analysis for both basic and applied research endeavors.