最长的相反是回家的最短路线:高温超导实验开发复杂的多域蛋白激酶

领导发现项目往往依赖于重组蛋白包括仅仅他们的催化域。然而,多域酶的催化活性是调制的辅助区域,提供潜力和勘探目标酶的变构网站活动。
为了解决这个问题,我们运用我们的专业知识的重组蛋白生产支持在两个多域蛋白激酶:高温超导Citron Rho-Interacting激酶和Traf2 Nck-Interacting蛋白激酶。CIT是2017 - 449 - aa aa蛋白质化合物测试中使用激酶结构域的版本,虽然TNIK是1360 - 367 - aa aa蛋白质生产版本只包括催化领域。与长激酶版本支持药物发现项目,我们表达了不同形式的重组CIT TNIK在昆虫细胞和杆状病毒系统和我们确定了宽容的条件来获取他们的活性形式。CIT已成功表达为1461 - aa版(170 kDa),当TNIK表示为完整的酶(160 kDa)。他们的催化活性是配置一个HTS-suitable荧光技术分析384年/板格式。有效的激酶都是被筛选基质的肽库和酶反应的动力学性质完全特征。最后,各自expression-purification程序up-scaled高温超导活动支持2000000种化合物,导致均匀批活跃的激酶。