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测量T细胞对COVID-19的免疫反应

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更多地了解一个人对SARS-CoV-2的免疫反应强度,可以帮助科学家更好地了解对病毒的免疫,以及个体之间反应不同的原因。

牛津Immunotec最近发布了一种新工具,可以测量T细胞对SARS-CoV-2的免疫反应,T- spot发现SARS-CoV-2工具包
为了更多地了解T-SPOT技术,了解它如何帮助评估一个人对SARS-CoV-2的免疫反应强度,以及为什么这很重要,188金宝搏备用采访了牛津免疫中心医疗事务副总裁安德鲁·马金。

安娜·麦克唐纳(AMD):到目前为止,我们对SARS-CoV-2的免疫力了解多少?

安德鲁·马金(AM):
目前,人们对SARS-CoV-2的免疫力知之甚少。令人鼓舞的是,大多数人看起来都有发展一个对病毒的先天和适应性免疫反应,这表明以前的感染可能提供一定程度的保护,防止再次感染,但由于SARS-CoV-2是如此新,这仍然是未知的证实。

可以预见的是,初次感染会使人在一段时间内获得一定程度的免疫力。但是,关于反应的稳健性、免疫的持续时间以及免疫的组成部分——抗体、细胞和血液中的其他标志物——仍有许多未知因素。抗体反应和T细胞介导的反应已经在恢复期人群中被检测到,但我们仍然不确定这是否会赋予任何保护性免疫1

AMD:测量T细胞对SARS-CoV-2的免疫反应能告诉我们什么?

问:
测量T细胞对SARS-CoV-2感染的反应可以告诉我们患者样本中是否有任何T细胞识别用于检测的SARS-CoV-2特异性肽。如果一个人有SARS-CoV-2反应性T细胞,这可能表明他之前接触过病毒。这是一个快速发展的领域。研究人员现在知道了T细胞在消除SARS-CoV-2中发挥作用。这可能对诊断、预后和对SARS-CoV-2的长期免疫产生重要影响。

AMD:你能给我们介绍一下T-SPOT技术吗?

问:
T-SPOT技术是一项成熟的技术.它是在60多个国家批准用于临床检测结核病感染。自T-SPOT技术发布以来,已经进行了超过2000万次临床测试,

  • 使用从外周血中制备的标准化样本,其中:
    • 减少因素的影响可能会影响结果,比如其他治疗
    • 标准化测试中的单元数,以标准化样本之间的单元数变化
  • 允许响应T细胞的数量被枚举,以精确评估T细胞的响应
  • 是否能够保持性能,甚至在免疫抑制个体的样本中
  • 能在高位运行吗-体积实验室使大型测试项目得以推出

这项开创性的技术已经在700多篇同行评审的出版物中被描述,显示了该测试在各种临床和流行病学环境中的出色表现,包括艾滋病毒阳性,抗肿瘤坏死因子α治疗患者,医护人员筛查和新进入者筛查等等。

外周血单个核细胞(pmcs)从血液样本中分离,清洗和计数。然后,将特定数量的pbmc和针对相关疾病或病症的特异性抗原添加到微量滴度板的孔中,并与干扰素- γ (ifn - γ)抗体结合。

之前遇到过特定抗原的T细胞在活的有机体内(由于感染)会对抗原有反应在体外通过分泌ifn - γ。受试者的T细胞分泌的ifn - γ被涂覆在每个孔底部的抗ifn - γ抗体捕获。单个反应T细胞的数量可以通过观察每个T细胞分泌IFN-gamma的足迹来枚举。


1. 使用常规的静脉切开术和标准的采血管收集血液样本,从中分离出一组白细胞,即外周血单个核细胞。细胞被清洗,计数和标准化,以创建一个标准的细胞悬液。

2. 标准数量的细胞被添加到专门设计的培养皿中,并用所研究疾病的特异性抗原刺激。对这些抗原有反应的细胞会释放一种被称为细胞因子的化学信使。

3. 细胞因子抗体用于直接捕获细胞释放的细胞因子。一个次要的标签添加抗体并与捕获的细胞因子结合。

4. 加入检测试剂并与次级反应标签抗体这个反应会产生斑点,这是细胞因子释放的足迹。然后点被列举出来。


AMD:感染后多久能检测到T细胞?

问:
如何感染后能很快检测到T细胞还有待观察。然而,据报道,在感染SARS-CoV-2约1周后,在个体中检测到T细胞症状出现2、3这种早期T细胞检测可能很重要。我们知道,大多数感染SARS-CoV-2的人在感染后第10天至21天之间可以表现出抗体反应4-6

AMD:这种检测方法与其他血清学检测方法(如检测IgG或IgM抗体)相比如何?它有什么优势?

问:
T-SPOT Discovery SARS-CoV-2试剂盒旨在用于评估细胞-利用T-SPOT技术平台(ELISPOT),结合SARS-CoV-2衍生的病毒肽池,对SARS-CoV-2进行CMI检测。

据报道,抗体介导免疫的测量有几个局限性。重要的是,如果抗体反应延迟,或者没有明显的抗体,感染后可能检测不到抗体
响应7、8.因此,了解CMI可能有助于更好地理解对SARS-CoV-2感染的免疫反应,特别是对那些没有产生可测量抗体反应的个体。

T- spot技术还可能允许枚举SARS-CoV-2反应性T细胞,它可能提供对SARS-CoV-2免疫的额外信息,并可能防止再次感染。然而,这还有待证实和T-SPOT发现SARS-CoV-2仍然是“仅用于研究”的测试。

参考文献

1李志强,李志强,李志强,等。COVID-19患者和未暴露人群中T细胞对SARS-CoV-2冠状病毒的反应靶点Cell 2020: 181;1-13

2王志强,王志强,王志强,等。在非严重的COVID-19病例中,支持病毒清除和患者康复的伴随免疫反应的广度。medRxiv 2020: 2020.0220.20025841

3魏斯科普夫,施密兹,李国强,等。急性呼吸窘迫综合征患者sars - cov -2特异性t细胞的表型medRxiv 2020: 2020.04.11.20062349

4赵娟,袁强,王慧,刘伟,廖旭,苏勇,等。2019年新型冠状病毒病患者对SARS-CoV-2的抗体应答medRxiv。2020:2020.03.02.20030189。

5李伟,王超,李伟,王超,等。COVID-19患者SARS-CoV-2特异性抗体应答。medRxiv。2020:2020.03.18.20038059。

6刘伟,刘林,寇刚,郑勇,丁勇,倪伟,等。基于核衣壳和刺突蛋白的elisa检测SARS-CoV-2抗体的评价。medRxiv。2020:2020.03.16.20035014。

7吴峰,王安,刘敏,等。在COVID-19康复患者队列中对SARS-CoV-2的中和抗体反应及其影响medRxiv 2020: 2020.03.30.20047365。

8世界卫生组织,科学简报。COVID-19背景下的“豁免护照”。


T-SPOT®Discovery™SARS-CoV-2仅用于研究:不用于诊断程序

安德鲁·马金接受了科技网络科学作家安娜·麦克唐纳的采访。188金宝搏备用

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安娜·麦克唐纳
安娜·麦克唐纳
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