聚合β-淀粉样蛋白对阿尔茨海默病记忆关键细胞信号通路影响的分析

根据文献资料，细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路与记忆有关，并受环境刺激的调节。在阿尔茨海默病中，进行性认知障碍被视为一个经典特征。这些缺陷被认为是由聚集β -淀粉样肽1-42 (Aβ)引起的进行性突触功能障碍的结果。Zhu等人(2002)表明，Aβ可诱导对记忆至关重要的激酶的破坏。在阿尔茨海默病晚期，ERK激活相对于早期阶段和对照组受到抑制(Webster et al. 2006)。体外研究也表明，在某些条件下，Aβ或片段在神经元细胞模型中抑制ERK或下游cAMPresponse元件结合蛋白(CREB) (Daniels et al. 2001)。

在这里，我们利用SH-SY5Y成神经细胞瘤细胞系评估了用Aβ治疗后检测ERK和CREB磷酸化水平变化的能力。a β采用文献中描述的方法进行寡聚(FA et al. 2010)。采用两步HTRFR检测工艺，在96孔透明底成像板中进行细胞电镀和处理。裂解后，等分物转移到单独的lv384孔检测板上进行磷酸化和总ERK和CREB检测。中和抗体还测试了其抵消Aβ抑制作用的能力。通过免疫细胞化学和显微镜分析检测Aβ结合和抗体中和。所有的微板读取和细胞成像步骤都是使用一种新型细胞成像多模式阅读器进行的。这种结合提供了一种有效、可靠的方法来测试新分子，以对抗疾病的退行性影响。