定量、高通量、荧光生物测定法检测血吸虫生存能力

本应用笔记介绍了一种基于荧光强度的微量滴度板检测方法，使用BMG LABTECH的POLARstar Omega可重复检测血吸虫的生存能力。

该检测的原理是基于染料、二乙酸荧光素(FDA)和碘化丙啶(PI)的不同膜透性。二乙酸荧光素能够穿过活细胞的膜。一旦进入细胞，酯酶就会切断二醋酸盐，并释放荧光素，从而产生与活细胞数量直接相关的可测量荧光信号。相反，碘化丙啶不能进入活细胞。这种染料只有在细胞膜受损时才会染色死亡细胞的DNA。同时检测碘化丙啶和二乙酸荧光素的措施使我们能够开发一种基于荧光的微板生物测定方法，以改进血吸虫生存能力的检测。该方法适用于96孔和384孔格式，定量并提供体外培养期间寄生虫活力的客观读数(相对荧光单位)。使用这种灵活的生物测定方法，我们证明了它在检测血吸虫对硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶(auranofin)已知抑制剂反应的活力方面的多功能性。