庆祝核镜技术20周年
2021年是Nucleofector®技术问世20周年,这是一种被引用超过10,000次的非病毒细胞转染方法。在其发展的20年里,这项技术为研究人员提供了一种有效修改难以转染的细胞的工具,推动了从药物发现到细胞和基因治疗等领域的研究。
为了庆祝这一里程碑,188金宝搏备用我们采访了龙沙高级副总裁兼生物科学解决方案负责人阿奇·卡伦。在这次采访中,Archie讨论了Nucleofector®技术的发展,强调了它是如何支持和推动基础和应用研究的。他还探讨了Nucleofector®平台令人兴奋的旅程中的一些最新发展。
安娜·麦克唐纳(AM):你能给我们讲讲Nucleofector®Technology的历史吗?
阿奇·卡伦(AC):Nucleofector®技术发明于20多年前,是为了应对科学家们所面临的难以转染的原代细胞和细胞系的挑战。传统的转染方法,如脂质体转染或电穿孔,不能提供可接受的转染效率和细胞活力,特别是对免疫细胞。Nucleofector®技术是专门为解决这些问题而创建的。
在其20年的历史中,该平台不断发展,以进一步提高结果并服务于全球研究人员的新需求。这项技术已经发展到支持新的应用,从CRISPR筛选到细胞和基因治疗。随着由导电聚合物制成的耗材的引入,Nucleofection®程序创造了更温和的条件,防止Al的释放3 +转染期间可导致转染后细胞死亡的离子。这些新的Nucleocuvette®耗材为4D-Nucleofector®平台铺平了道路,旨在支持易于扩大和转移转染条件到任何给定的格式。
龙沙有着悠久的快节奏和持续创新的历史,倾听客户的声音,调整技术,以更好地满足行业不断变化的需求。Nucleofector®LV单元是龙沙最新的模块,设计用于良好生产规范(GMP)耗材,以实现细胞和基因治疗的高细胞数量转染。
AM: Nucleofector®技术与其他转染方法相比如何?
交流:Nucleofector®技术是电穿孔的一种先进形式,结合了Nucleofector®设备,专业的Nucleofector®解决方案,和优化的协议,创建一个独特的转染系统。与其他转染方法(如脂质转染或化学转染)相比,结果显示对难以转染的细胞具有更好的重现性、性能、转染效率和更高的细胞活力。
标准的电穿孔技术在细胞膜上制造一个短时间的电场,使DNA或其他底物传递到细胞质中。相反,Nucleofection®程序将DNA直接送入细胞核。因此,研究人员可以加速研究,而不必等待细胞核在细胞分裂过程中分解并吸收引入的DNA。转染后3小时即可观察到基因表达,转染效率可达90%以上。
问:Nucleofector®技术在哪些方面为基础研究和应用研究创造了新的机会?
交流:Nucleofector®平台的多功能性使科学家能够根据自己的需要扩大研究规模。该技术支持广泛的转染应用,从低到中通量和细胞数量的基础研究到96孔或384孔格式的大规模应用,如CRISPR文库屏幕。大容量的格式可以一次转染多达20亿个细胞,使其非常适合自体非病毒细胞和基因治疗。不依赖于底物的转染条件支持一次多次敲除的复杂实验设置,以及核糖核蛋白(RNPs)和多肽的转染。此外,凭借龙沙全面的细胞生物学产品组合,为客户提供原代细胞和细胞培养基,补充Nucleofector®技术。与Cocoon®平台的集成有助于支持下一代患者特异性细胞治疗制造。
问:在过去的20年里,Nucleofector®技术是如何满足科学家不断变化的需求的?
交流:自推出以来,Nucleofector®系统已经支持了大量的创新,并已被用于超过10,000份同行评审的出版物。新推出的4D-Nucleofector®平台提供了进一步的灵活性、易用性和更安全的转染条件。模块化的概念有利于为研究人员的特定应用需求量身定制的多功能设置。GMP耗材和导电聚合物允许用于细胞和基因治疗应用的安全,非病毒转染。96孔模块和384孔HT-Nucleofector®系统通常用于原代细胞背景上的CRISPR筛选。易于使用的试剂盒提供了最佳的转染条件和可转移性,因此一旦建立,转染条件可以直接以任何其他格式使用,为研究人员提供了一个完全满足其应用需求的工具箱。
AM:你能谈谈Nucleofector®Technology的下一阶段的发展吗?用户可以期待哪些改进?
交流:新一代4D-Nucleofector®平台最近已经推出。现在,用户可以从改进的用户体验中受益,并将96井设备完全集成到中等产量的应用中。这个新版本完成了一个新的设计和用户友好的软件实验设置和数据管理。4D-Nucleofector®平台客户可以期待持续的高标准性能支持的技术,甚至更容易使用。
一个rchie Cullen接受了科技网络科学作家Anna MacDonald的采访。188金宝搏备用