杂种细胞单克隆抗体生产和噬菌体展示:技术的目的?

你所需要的理想抗体亲和力是什么?项目的最终应用程序是什么?你有任何时间表和预算限制吗?这些是一些参数你可能不得不考虑如果你是杂种细胞发展之间犹豫和噬菌体展示单克隆抗体生产项目。这个简短的指南旨在突出这两种技术的主要优缺点,为了帮助您确定最好的方法为你的需求。

杂种细胞

杂种细胞代最早于1975年研制成功由乔治·科勒和塞萨尔Milstein。它依赖于鼠标B免疫脾细胞的融合与骨髓瘤细胞。感兴趣的不朽的B细胞产生抗体然后选择和最好的克隆是为了获得单克隆抗体筛选所需的抗原亲和力。

杂种细胞发展的更传统的方法用于生成单克隆抗体,因为它允许你产生高度敏感的绑定在一个合理的价格。高特异性使其特别适用于分析发展。同样重要的是要注意,集成的哺乳动物的起源细胞在活的有机体内后转译修饰,降低聚合或识别故障的风险。

这些特征表明,杂种细胞也可能适合治疗性抗体的发展,然而,有一些重大的缺点使用为此杂种细胞,值得注意。首先,杂种细胞发展过程很长:平均需要6 - 8个月获得合理的单克隆抗体(对噬菌体展示的几周)。其次,小鼠的抗体意味着进一步人性化治疗的目的,重要的是诱发一个额外的费用。由于这些原因,正在逐步取代了杂种细胞发展更快、更biotherapeutic发展适当的技术。

噬菌体展示

单克隆抗体生产基于噬菌体展示代表作为一个替代杂种细胞的药物开发技术。

的噬菌体展示抗体方法在1985年被归因于史密斯。为特定的抗体基因序列编码集成到丝状噬菌体的DNA序列,它允许对噬菌体衣壳的表面的表达。这个特点建立了基因型和表型之间的联系。噬菌体感染大肠杆菌并使用其内部复制系统,不断显示新的噬菌体,没有杀死宿主细胞。这使得快速生产的抗体,在大量。天真的图书馆或免疫噬菌体(10¹⁰噬菌体)因此构成,可以用来检测一个感兴趣的抗原抗体相互作用由于筛查方法。图书馆可以生成任何动物,甚至人类,人类抗体可以直接屏幕。基因型与表型,也容易获得直接访问序列,这有利于进一步工程或重组蛋白的生产。

与杂种细胞开发技术,当一个天真的图书馆已经可用,这个过程可以非常快,通常只持续几周后,它还允许您屏幕更大的抗体的多样性。噬菌体展示通常用于毒理学和抗蛇毒素研究由于其能够促进工作与有毒和non-immunogenic抗原。

杂种细胞相比,噬菌体展示是更昂贵的,有机会绑定可能导致较低的亲和力,当平移天真的库。

建立显示技术是最适合你的需要,你应该权衡每个方法的优点和缺点,总结在下表中:

	杂种细胞	噬菌体展示
优势	大规模的生产 高的抗体产生 高特异性 抗体的敏感性高 更低的成本	大规模的生产 快速的过程 伟大的控制选择过程 屏幕容易大量克隆的多样性 可以直接屏幕库 屏幕可能有毒的抗原 没有免疫原性问题(为天真的库) 没有克隆可行性问题 直接访问序列 没有动物使用(天真的库)
缺点	长时间的一代 不完整的抗原决定基识别 通常需要人性化	更昂贵的 绑定可能有较低的亲和力 技术上比较困难