克服慢病毒载体生产的挑战

慢病毒载体是通用的基因传递工具，能够转导多种细胞类型。然而，生产大量高质量的慢病毒可能面临几个挑战。全球生物科技公司GenScript最近推出了研究慢病毒载体包装服务，该服务利用公司专有的慢病毒生产平台，以确保始终如一地生产完整的功能病毒。

为了更多地了解这项服务，以及它如何解决与慢病毒生产相关的一些困难，188金宝搏备用采访了GenScript的Koh孟Yong博士。在这次采访中，孟Yong博士还讨论了使用慢病毒载体的优势以及它们正在实现的一些应用。

安娜·麦克唐纳(AM):你能解释一下什么是慢病毒并重点介绍一下它们的应用吗?

Koh孟Yong:慢病毒是直径通常为80-120纳米的RNA病毒，其特征是在疾病出现之前在受感染的宿主细胞内有很长的潜伏期。慢病毒属于逆转录病毒家族，有能力将其病毒基因组整合到受感染的宿主细胞中。为了使它们在研究中安全使用，科学家们制造了重组慢病毒，这种病毒保留了与宿主基因组整合的能力，而不会引起疾病。这使得它们成为细胞工程应用的理想载体，其目的是创建稳定表达或缺乏特定基因的修饰细胞。

主持人:如何利用慢病毒来帮助COVID-19药物研发工作?

KMY:慢病毒被用来将单个病毒蛋白传递到人类细胞中，以了解它们如何与人类蛋白相互作用。通过研究这些相互作用，研究人员有望确定现有的药物，这些药物可以破坏这些相互作用，并有可能被用作病毒感染患者的疾病治疗。

AM:与其他病毒载体相比，使用慢病毒载体的主要优势是什么?

KMY:慢病毒首先感染一个细胞，然后将它们的RNA物质释放到宿主细胞的细胞质中。在那里，RNA被转化为DNA，最终整合到宿主细胞基因组中，对宿主细胞进行长期的基因改造。这使得它们在永久性地改造细胞方面非常高效，允许病毒基因组的稳定表达。其次，病毒基因组携带的数量很大，使其成为将大型转基因送入细胞的理想载体。可以进一步修饰包膜蛋白，使病毒感染广泛的组织类型和慢病毒具有感染分裂和非分裂细胞的能力。最后，它们的免疫原能力较低，确保宿主细胞免疫系统不会对病毒产生免疫反应。

AM:慢病毒载体是如何产生的?这个过程的主要挑战是什么?

KMY:首先，你将编码病毒颗粒的包装质粒和携带转基因的质粒载体包装到病毒中，并将它们共转染到培养基中生长的包装细胞系中。共转染几天后，释放到培养基中的病毒颗粒可以收获，并进行纯化和浓缩等下游处理。在制备过程中，影响病毒制剂数量和质量的变量有很多。这些包括包装细胞系的转染效能、细胞系的生产能力以及病毒颗粒的纯化和浓缩。

问:你能告诉我们更多关于GenScript的研究慢病毒载体包装服务以及它是如何应对这些挑战的吗?

KMY:在GenScript，我们开发了一种独特的生产方案，优化了以最高产量生产高纯度病毒。这些最佳条件适用于病毒生产方案的每一步，包括:具有高可扩展性和病毒产量的优化转染方案，以及产生无动物生长因子的慢病毒的无血清系统。这在处理对这些生长因子污染更敏感的原代细胞时尤其重要。我们也有一个仔细和彻底的病毒净化和浓缩方案，以确保病毒颗粒保持完整和功能。此外，我们有多种方法来测量滴度和质量控制，以确保病毒制剂没有支原体或细菌污染。所有这些都转化为更高质量、完整和功能性的病毒制剂，帮助我们客户的下一个细胞工程项目取得成功。

Koh孟Yong接受了科技网络科学作家安娜·麦克唐纳的采访。188金宝搏备用孟博士Yong是GenScript公司化验细胞系和慢病毒包装服务的全球产品经理。