介绍主要的细胞培养

与两种类型的细胞进行细胞培养过程:

主细胞-细胞分离直接从人类或动物组织使用酶或机械方法。一旦隔离,他们被放置在一个塑料或玻璃容器支持专业人工环境中含有重要的营养物质和生长因子增殖的支持。主要细胞可能是两种类型——附着或暂停。贴壁细胞增长,据说需要附件anchorage-dependent细胞。贴壁细胞通常来源于组织的器官。悬浮细胞生长和不需要附件据说anchorage-independent细胞。大部分悬浮细胞与血液系统隔离。一些可用tissue-derived悬浮细胞如肝细胞或肠道细胞适合ADMET应用程序。尽管主要细胞通常具有有限的寿命,他们提供了大量的优势而细胞系。当执行主细胞培养,研究人员获得一个机会来研究不仅捐赠者和细胞。 Several factors such as age, medical history, race, and sex can be considered when building an experimental model. With a growing trend towards personalized medicine, such donor variability and tissue complexity can only be achieved with use of primary cells and are difficult to replicate with cell lines that are very systematic and uniform in nature and do not capture the true diversity of a living tissue.

细胞系细胞,一直不断地通过在很长一段时间和获得同质基因型和表型特征。可以有限或连续细胞系。一个无限增殖或连续细胞系已获得无限增殖的能力,通过基因突变或人工修改。有限细胞系亚文化圈了20 - 80通道之后,他们开始衰老。细胞系最好是用于方便易于处理和广泛发布。然而,他们不太喜欢生物相关的选项,因为它们已经失去了原始的真实特点组织从他们被孤立。串行使已知导致细胞系基因型和表型变异。变化往往是到目前为止从原来的组织,他们不模仿在活的有机体内环境非常密切。细胞不代表原始组织可能导致假阴性或假阳性结果。

使用主细胞和细胞系的争论继续挑战的研究人员。人们普遍理解,主要细胞生物和生理有关在体外工具比细胞系为研究人类和动物生物学。然而,几十年来,细胞系已用作标准工具。连续通道,mischaracterized或受污染的细胞系已进入出版物。例如,评估对细胞系质量总结,18 - 36%的细胞系被误判或交叉污染(休斯P et al ., 2007)。有趣的是,最近的一项研究表明,肿瘤,到目前为止,最高的文学基于污染细胞系(Horbach et al ., 2017)。在同一篇文章中,作者发现,大约有32755篇文章报告研究与鉴定细胞,反过来,估计有一百万其他论文引用的。

即使细胞系的类型,据称,选择压力和遗传漂变会导致细胞系表现出减少或改变功能。细胞系往往会在串行使变异,结果表明基因型和表型变化从原来的捐献者。例如,肖等人证明了人类胚胎肾细胞系HEK 293年,导出了腺病毒的主要文化转型HEK细胞,相似性更大的神经元比肾细胞¹。蛋白质组学的生物信息学分析表型透露,Hepa1-6细胞系缺乏线粒体,反映重排的代谢途径相比,主要的肝细胞(Pan et al ., 2009)。

进一步查看选定参考讨论与细胞系的使用相关的问题:

• 癌症难题,增加临床成功的早期药物发现
• 自然杂志-公告:时间错误处理细胞的识别
• 基因和转录进化改变癌症细胞系药物反应
• 阅读字里行间——新文章引用如何在细胞系基因漂移导致实验方差

为研究社区承认改进研究的临界,这是同样重要的是接受和认识到(我使用可靠的构建块。e试剂、细胞)发展良好的临床前模型的基础。担忧的细胞系的研究引起了许多期刊,包括的自然出版集团所有提交,要求细胞系验证研究。拨款申请也受到影响,例如,美国国立卫生研究院的最近修改其资金使用指导方针,确保只有高质量的资源进行研究²。

引用:

¹肖et al。(2002)。美国实验生物学学会联合会J 16 (8): 869 - 71

²https://grants.nih.gov/grants/guide/notice - files/not od - 15 - 103. - html

的电子书的主要细胞vs细胞系”,由这位科学家看起来进一步的挑战和问题与细胞系和主细胞的使用如何克服这些,下载您的免费拷贝。

三维培养

随着新技术的出现在3 d的文化中,人类主要细胞结合的使用这些先进的细胞培养技术正在成为新的黄金标准模拟细胞微环境在体外并实现改进的结果。这些专业模型能更好地模拟天然细胞在活的有机体内环境,导致更多的生物相关的方法和提供更可靠的数据。最近出现一个明确的需要,特别是在制药药物发现管道,主要细胞在三维文化技术,可以提供吞吐量在96年——好吧,384,和1536 -格式,让研究人员来生成大量的组织如为药物筛选模型。使用更多的生理相关的能力在体外模型创建patient-derived主要细胞可能会加速的发现和发展下一代的个性化治疗。几个因素如年龄、病史、种族和性别时可以考虑使用主细胞建立一个实验模型。捐赠的可变性和组织复杂性等只能通过使用主细胞和难以复制的细胞系,在本质上是非常系统和统一,不捕捉真正的活组织的多样性。

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使用低温贮藏的好处主要动物细胞

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