利用pH传感器染料筛选内化抗体的简单平板法
受体介导的内化是抗体药物偶联物(adc)的关键作用机制。然而,目前研究抗体内化的方法存在一些局限性,包括:1)多步骤过程不适合筛选;2)低信背景比;3)不适合动力学测量。我们开发了一种方法,可以减轻与传统内化分析相关的问题。方法包括:1)采用水溶性、光亮、光稳定的pH传感器染料(pHAb)进行内化研究;2)一种直接从细胞培养基中偶联pHAb染料与抗体的优化方法;3)一种96孔、高信背景比的板基检测方法,用于实时测量内化和筛选内化。
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