可逆性亲电试剂和不可逆性亲电试剂激活TRPA1的差异表明参与了多磷酸盐以外的胞质辅因子

瞬时受体电位锚蛋白1 (TRPA1)是一种非选择性阳离子通道，表达于痛觉传入神经的一个子集。当TRPA1被激活时，可以唤起痛觉反应(例如疼痛和防御反射)，以及周围神经末梢的神经源性炎症。TRPA1可以被许多内源性(炎症介质)和外源性(污染物，食物)激动剂激活。许多TRPA1激动剂是亲电性化合物，共价修饰TRPA1上活性半胱氨酸残基，导致通道激活。根据化合物的结构，亲电试剂可以通过可逆或不可逆反应结合。在这里，膜片钳技术和钙成像已用于表征人TRPA1 (hTRPA1)通道活性(在HEK293细胞中表达)存在可逆和不可逆亲电试剂。钙显像显示可逆亲电剂(如烯丙基异硫氰酸酯[AITC])和不可逆亲电剂(如碘乙酰胺[IA]和n -乙基马来酰亚胺[NEM])都能快速诱导TRPA1激活。相比之下，膜片钳研究表明不可逆和可逆亲电TRPA1激活之间存在差异。全细胞膜片钳研究表明，与AITC相比，NEM降低了TRPA1激活的动力学和强度。此外，单通道膜片钳实验表明，与AITC和H2O2相比，NEM降低了打开概率。 Both whole cell patch and excised patch clamp recordings were performed in the presence of 5mM polyphosphates. In preliminary gramicidin perforated patch recordings there was no difference in NEM and AITC-evoked TRPA1 activation. The data suggests that cytosolic factors other than polyphosphates are important for TRPA1 activation by irreversible electrophilic ligands.