测量二维里Coeffient和蛋白质分子密度的提高结晶

生物制药发展的挑战之一是测量活性蛋白质的三维结构。x射线的衍射光束通过一个可以测量晶体结构产生一个三维电子的密度在一个样品的照片。从这个原子的位置样本以及他们的化学键可以确定。x射线晶体学能够帮助识别结构,因此活性蛋白质的功能。该技术的一个关键问题就是样品的必要性以结晶形式。蛋白质结晶过程是很困难的,因为溶剂条件下对样本的能力产生重大影响,形成晶体。

第二维里系数(B22或A2)是一个热力学参数描述了蛋白质之间的相互作用强度和溶剂,并且可以与蛋白质溶解度。这个参数作为潜在的指标用于蛋白质具体化在给定溶剂。负维里系数值是指示性的吸引作用,大分子趋于self-associate。正维里系数值表明排斥相互作用,大分子倾向于溶解。

可以使用静态光散射(SLS)探测器测量的第二维里系数蛋白质。这个参数可以测量使用一批SLS探测器或尺寸排阻色谱(SEC)联系SLS探测器。

在这张海报莫尔文仪器SEC-MALS 20探测器是连接到一个折射率(RI)浓度检测器和一个在线微分粘度计(DP)。这个的优点是不仅测量蛋白质分子量,随后第二维里系数,而且固有粘度(IV)的样本。四世是一个样本的分子密度成反比所以可以用来提供信息样本构象以及允许水力半径(Rh)计算。

第二维里系数人血清白蛋白(HSA)一直在用两个不同的缓冲条件下,磷酸缓冲pH值7.4和柠檬酸缓冲液pH值4.1。有趣的和对比数据得到这两个缓冲的条件