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NutriStem®hPSC XF培养基一种用于hES和hiPS细胞的优质无xeno,无血清培养基

拓展卓越文化

NutriStem®hPSC XF培养基是一种明确的、无异种、无血清的培养基,旨在支持人类诱导多能干细胞(hiPS)和人类胚胎干细胞(hES)细胞在无饲料环境下的生长和扩张。NutriStem®hPSC XF培养基提供了培养人类多能细胞的能力,而不需要高水平的bFGF和其他刺激生长因子或细胞因子。低蛋白配方只包含维持hES和hiPS细胞所需的最基本成分,提供简化的培养基并保持细胞的全部分化潜力。NutriStem®hPSC XF培养基的定义,无异种配方提供一致的培养基性能和可预测的细胞行为,以及在长期培养(超过50代)中提高的重复性。此外,在NutriStem®hPSC XF培养基中培养的细胞表现出优异的附着和增殖率,使该培养基成为高通量筛选应用的理想培养基。

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图1:NutriStem®hPSC XF培养基可使未分化hES和hiPS细胞出色增殖。在营养茎®hPSC XF培养基和无饲料培养的主要竞争培养基中,在matrigel涂层的96孔板中培养H1 hES细胞的增殖。每24小时更换培养基并评估增殖情况

正常细胞形态及多能性功能评估

形成致密的细胞集落,核质比高,核仁突出,集落边界明显,是健康未分化hES和hiPS细胞的特征性形态特征,可以通过相对比显微镜观察到(图2)。人类多能干细胞具有分化为所有三个胚层的细胞类型的潜力,即内胚层、中胚层和外胚层。这种分化潜力通过体外培养的胚状体内的自发分化(图3)和体内形成的畸胎瘤(图4)来评估。

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图2:菌落形态正常。H1 hES细胞(面板A)和ACS-1014 hiPS细胞(面板B)在NutriStem®hPSC XF培养基上的matrigel涂层板上培养,显示典型的正常无饲料hES和hiPS细胞培养的菌落形态,包括紧密致密的均匀菌落和明显的菌落边缘。

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图3:胚状体形成。将H9.2 hES细胞在Matrigel基质上的NutriStem®hPSC XF培养基中培养16代以生成胚状体(EBs),以评估其多能性。多能性H9.2细胞悬浮在添加血清的培养基中,在那里它们自发形成含有胚胎胚层细胞的EBs。通过检查H&E染色的14日龄EBs的组织学切片,确定了以下细胞类型:(A)神经花环(外胚层),(B)微管蛋白染色的神经花环,(C)原始血管(中胚层),(D)巨核细胞(中胚层)。

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图4:Taratoma形成。H9.2 hES细胞在NutriStem®hPSC XF培养基中使用人包皮成纤维细胞(HFF)喂养层培养11代。随后将hES细胞注射到SCID-beige小鼠后腿肌肉中进行体外多能性评估。在注射后12周畸胎瘤的h&e染色组织学切片中,从所有三个胚层中鉴定出以下组织:(A)软骨(中胚层),(B)上皮(内胚层),(C)神经莲座(外胚层)。

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