蜂蜜中转基因花粉与转基因面粉的实时荧光定量PCR鉴别

2011年，欧洲法院裁定有必要证明花粉是蜂蜜的天然成分，而不是一种成分。后来，在2013年，欧洲议会将花粉定义为蜂蜜的天然成分。根据法规(EC) 1829/2003，这一决定避免了在转基因(GM)花粉占该物种花粉比例超过0.9%时，需要对蜂蜜进行标签的强烈财务影响。相反，面粉的存在，它不是蜂蜜的天然成分，但当工业磨坊在蜂箱附近时可能会发生，必须根据成分的法律标签框架进行处理。因此，迫切需要区分花粉和面粉。在过去的几年里，没有发现有用的技术可以将花粉从其他种类的污染物中分离出来。
在这项工作中，我们研究了定量实时PCR与质粒校准和Taqman化学相关联的能力，以区分不可避免的转基因花粉和转基因面粉污染。使用来自2x106质粒拷贝/µL溶液的7点稀释系列来建立两条校准曲线，一条用于转基因，另一条用于种特异性基因。从葡萄牙无转基因地区马德拉岛蜂蜜中提取的DNA，加入花粉、面粉或以女性祖先为转基因供体的半合子分离F1群体的胚胎，获得了相对转基因拷贝数的良好估计。添加蜂蜜以减少基质效应。两种反应的PCR效率均为94% ~ 99%。这种方法考虑到有可能区分花粉和面粉，因此有助于国家服务机构控制标签，并为粉制公司制定建议，以尽量减少面粉进入蜂箱。