逆转录定量聚合酶链反应实验中体积相关抑制剂的标准化

简介
逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)数据的可靠性很大程度上取决于技术变化。这种变化主要归因于RT步骤。标准化并不总是可能的，必须找到折衷办法。由于技术要求，目前的共识是，RT步骤(CA-RT)应使用恒定量的总RNA。由于RNA分离收率是可变的，在RT反应中使用可变体积的核酸提取物。为了克服这些缺点，我们提出通过补充酵母转移RNA (CV-RT)来保持恒定RNA量，以恒定体积的RNA提取物进行RT反应。本研究的目的是确定CV-RT与经典的恒量总RNA (CA-RT)相比，是否可以提高RT-qPCR评估的可靠性。