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质量控制自动化在体外RNA转录

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Kyle Luttgeharm博士是安捷伦的产品经理,在那里他致力于为安捷伦的片段分析系统开发方法和分析。凯尔将做他的演讲“生产与分析”在体外转录RNA "在即将到来的188金宝搏备用在线研讨会,疫苗研究与开发2022


188金宝搏备用在之前的在线研讨会上与Kyle联系,进一步详细阐述了他的演讲,讨论了关键的质量控制分析在体外转录(IVT) RNA产物

罗克珊·纽曼(注册护士):我想先问一下你的背景。你是如何进入疫苗研究领域的?

Kyle Luttgeharm (KL):我的背景是平行毛细管凝胶电泳,该技术已广泛用于分离核酸的质量控制(QC)步骤下一代测序(NGS)。2016年,安捷伦认识到还需要提供高质量的IVT RNA分离。我们与当时一些顶级RNA治疗公司合作,将我们的技术转移到这个领域。

安捷伦最初开发的方法允许分离大小为6000个核苷酸的IVT RNA。然而,通过与这些公司合作,我们意识到还需要更长的IVT RNA的容量。我们提出了其他方法,将大小范围扩展到9000个核苷酸。所有的分离都在Agilent片段分析系统上进行,这是一个平行毛细管电泳系统,一次可以分离12、48或96个样品。当COVID-19 RNA疫苗获得批准时,人们对IVT RNA疗法和疫苗产生了巨大的新兴趣。有了这个,我们看到人们对我们的分离和在这个空间里使用我们的仪器有了更多的兴趣。

注册护士:您能否就您即将在2022年疫苗研究与开发在线研讨会上的演讲提供进一步的见解?


吉隆坡:首先,我将讨论一下RNA和IVT RNA疗法的历史,比如:我们是如何走到今天这一步的?然后,我将进入一个关于通用IVT RNA工作流程和DNA疫苗工作流程的讨论,以及平行毛细管电泳如何在整个不同核酸的QC通用过程的各个步骤中使用。

注册护士:与RNA疫苗相关的质量控制步骤是什么?

吉隆坡:当我们刚开始在这个领域工作时,重点是癌症疫苗。虽然这仍然是一个重点,但对于一些公司来说,我们确实看到该领域越来越多地转向传染病疫苗,因为我们最近都经历了不幸的大流行。


据我们所知,这两个工作流中的步骤实际上是相同的。你将从某种形式的合成DNA模板开始,聚合酶链反应产物或质粒,然后你将使用该DNA模板来执行你的在体外转录得到RNA。取决于模板是如何构建的,你可能会或可能不会使用外部聚腺苷化酶来添加聚(a)尾部你将会形成它直到它成为最终产物。最终,最终的产品将是公众需要的任何东西,他们会去当地的药店买到。我们有DNA试剂盒和RNA试剂盒,允许每个不同步骤的质量控制,以便您确定-在您正在移动的工作流程的每个点-材料适合其最终结果。


RN:您之前提到了安捷伦片段分析系统,该系统如何确保RNA的完整性和质量?

吉隆坡:我们有RNA试剂盒,里面有运行仪器所需的所有试剂,片段分析系统可以同时分离12、48或96个样本。它提供高分辨率的分离,以及IVT RNA片段的精确大小。


高分辨率的分离,加上我们的数据分析软件包,允许您通过定义感兴趣的产品区域来确定您的IVT RNA的纯度。你也可以看看里面还有什么,是否有杂质或不完整的转录或降解。我们精确的尺寸也提供了一定程度的信心,你所做的主峰实际上是感兴趣的乘积,它是正确的尺寸。你可以从我们的平台上得到这两种东西。


除了Luttgeharm博士在11月16日至17日的活动上的演讲外,我们还将邀请其他专家演讲者,他们将讨论诸如疟疾表位靶向疫苗、基于病毒样颗粒的疫苗和病毒的抗体基因编码识别等主题。对于那些有兴趣参加并加入其他志同道合的研究人员的人,您可以通过以下方式注册您的免费位置链接


Kyle Luttgeharm博士对技术网络会议团队负责人Roxanne Newman说。188金宝搏备用

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