定量蛋白质组学表明,只有一个子集的内质网有助于吞噬体

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时间,被杀死和有辱人格的病原体抗原表示,细胞器参与天然免疫与适应性免疫的关键方面。虽然已经确立,时间由质膜的膜(PM),核内体和溶酶体(endo / lyso),内质网(ER)膜的概念可能发挥重要作用在吞噬体的形成是讨论。然而,一个方法来估计准确的潜在来源的贡献细胞器和污染物的吞噬体蛋白质组一直缺乏。这里,我们已经开发出一种蛋白质组学的方法客观地量化各种细胞器的早期和晚期的贡献时间通过比较这些分数总膜和post-nuclear J774A原产地上层清液。1小鼠巨噬细胞细胞系。使用定量label-free质谱肽对应数以百计的蛋白质的丰度是5的估计和归因于一个细胞器(如点,endo / lyso,呃,高尔基体和线粒体)。这些数据结合SILAC方法旨在检测潜在污染物来源显示ER是phagosomal膜的一部分,贡献~ 20%早期的吞噬体蛋白质组。此外,只有一个子集的ER蛋白质是招募吞噬体,表明一个特定的子域(s)的ER可能参与吞噬作用。免疫印迹和免疫荧光显著验证这一结论;我们能够证明的呃呃的分数标记GFP-KDEL积累是排除在时间,而包含派生网罗蛋白质mVenus-Stx18招募。这些结果强调的有前途的新途径描述致病机制由利什曼虫、布鲁氏菌、军团spp。在ER-rich时间。

这篇文章是发表在分子和细胞蛋白质组学和可以自由访问。