发展3 d球体分析高温超导药物发现方法

抑制肿瘤细胞增殖的药物发现研究翻译不好从传统的二维(2 d)在体内体外实验研究。执行大多数抗癌药物化合物研究组织培养处理二维分析格式研究扩散的目的,生存能力和细胞凋亡。越来越多的科学证据表明癌细胞增长的三维(3 d)球状体体内研究的预测结果比2 d细胞培养格式。通常,使用各种方法创建球状体,如U-bottom盘子,悬滴或半固体媒体和分析领域的增长进行了使用显微镜,费时、费力、低吞吐量和缺乏再现性。文献曾报道使用一个自动化的成像仪监测三维球状体的大小和增长在96 -孔板(1),在球体形成4天从一组细胞的数量返回一个球体大小一致。这项研究强调了使用384 -低依恋U-bottom板结合Celigo®成像血细胞计数器图像和分析三维球状体的形成。这允许增加吞吐量,每个板块的复制和参数数量相比96 -孔板。U87MG细胞被用来创建tumorspheres 384 -孔板和随后分析了成像。数据说明,可再生的3 d在384孔板可以形成球状体。荧光可行性研究与成像仪使用像素强度进行了分析。 Moreover, the assay was validated for drug screen using various drug compounds that have shown antiproliferative effects. Together, these data demonstrate that the tumorsphere formation assay can be developed, validated and used for high-throughput anticancer compound screening in 384-well U-bottom low attachment plates using the Celigo Imaging Cytometer.