卫生研究公司宣布Cut-N-Glow作为一种新的蛋白酶传感、映射和检测工具

Cut-N-Glow触发一个绿色荧光“辉光”当病原体存在。光发射之后可以使用荧光计量化,或定性测定溶液变绿眼睛。

除了利用发射的荧光信号存在的蛋白酶,Cut-N-Glow,顾名思义,是设计一个条件失真将自组装GFP蛋白转化为一个站点特定的蛋白酶开关。我们的方法的变形是可逆的通过限制蛋白质水解N和C末端的GFP 11 protease-sensitive缆索,不遗余力地C功能区分我们的系统从其他GFP记者获得的荧光,而不是失去荧光蛋白水解作用在体外和体内。

“我们的实验很容易定制标准通过克隆技术来检测不同特异性蛋白酶,蛋白酶抑制剂,或地图蛋白酶底物在体外或体内的偏好,“大脑卡拉汉博士说。“这也是有效的和负担得起的。不需要化学合成因素或共基质。你只需要两个试剂,都是蛋白质,可以很容易地获得后大肠杆菌的表达。”

以其操作简单性和体外/体内多功能性,Cut-N-Glow系统有巨大的潜力实现基于作为蛋白酶的人类临床诊断的疾病检测和作为蛋白酶的研究工具。

人类临床诊断的应用包括:1)检测protease-based微生物感染、疾病如结核分枝杆菌、肉毒梭状芽胞杆菌、霍乱弧菌、隐孢子虫以及孢子,恶性疟原虫,鲁兹锥体;2)检测分泌蛋白酶与癌症有关,如人类kallikrien-3,俗称前列腺特异抗原(PSA);3)传感HIV蛋白酶,用于监控艾滋病疗法;4)检测细胞相关基质金属蛋白酶(MMPs)参与组织形态发生等改造,血管生成,肝硬化和关节炎。

潜在效用作为蛋白酶研究工具包括:1)裂解肽序列的识别一个特定的蛋白酶(底物的发现);2)负责裂开的蛋白酶的识别一个特定的肽序列(蛋白酶发现);3)识别的蛋白酶基因变异,通过突变,坚持在一个用户定义的肽序列(蛋白酶进化);和4)检测色谱特征蛋白酶的分数或实验室缓冲区(蛋白酶检测)。