V3西方墨点法时间削减一半

V3西方工作流也削减了传统免疫印迹过程从两天到一天。从蛋白质分离蛋白质转移到负载控制标准化量化结果,Bio-Rad产品显著缩短时间在每一步结果,同时保持高绩效。

”而不是两天做免疫印迹实验从头到尾,我们可以看到结果在一天内与新工作流,”奥尔德林戈麦斯博士说,加州大学戴维斯分校助理教授。

V3西方工作流由五个步骤组成,每个启用Bio-Rad家族的印迹仪器和/或产品:

五个步骤从分离到的结果

1。蛋白质分离使用标准™TGX没有污点™和Mini-PROTEAN®TGX没有污点预制凝胶
2。蛋白质凝固态可视化使用ChemiDoc™MP成像系统
3所示。蛋白质转移膜使用TransBlot®涡轮™传输系统
4所示。转移验证使用ChemiDoc像素的成像系统
5。免疫印迹验证使用ChemiDoc像素的成像系统

步骤1和2:蛋白质电泳分离和可视化
Bio-Rad标准TGX没有污点和Mini-PROTEAN TGX没有污点预制凝胶为研究人员提供完整的电泳分离的蛋白质样品在15分钟。凝胶包括一个独特的trihalo复合,使荧光检测的蛋白质在凝胶或膜在一分钟内使用没有污点时启用ChemiDoc MP成像系统。Coomassie凝胶染色方法需要两个小时才能完成。

步骤3和步骤4:蛋白质转移膜和验证的转移
Trans-Blot涡轮增压输送系统促进有效的蛋白分子量大范围转移在三分钟Bio-Rad TGX没有污点的预制凝胶。使用ChemiDoc像素的成像系统,研究人员可以立即可视化蛋白质转移之前污点成像膜的检测。凝胶还可以重新塑造建立蛋白质是否依然存在。

“我们使用了ChemiDoc议员,以确保我们的凝胶转移没有任何问题,”戈麦斯说。“这是不如朱红色染色乏味。通过这样做,我们可以继续信心知道我们不浪费任何抗体。”

第五步:验证免疫印迹
研究人员量化与管家蛋白免疫印迹实验传统规范化数据,通常需要剥离和第二次探索膜,或同时使用多个抗体探测。两个额外的步骤添加到协议,消耗试剂、时间和劳动力。此外,规范对管家蛋白可能会产生不准确的结果。

使用没有污点检测选项ChemiDoc议员的系统,研究人员可以量化总蛋白质标准化的目的。这没有污点总蛋白归一化法产生更快的定量结果与使用管家蛋白相对标准化的结果,从而导致错误。