给CRISPR推动在正确的方向上
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可以说是最热门的话题在生命科学,CRISPR继续成为头条新闻。便宜、快速且易于使用,CRISPR已经进入世界各地的实验室和一些被视为一切。
解决与当前系统相关的一些问题,IDT最近推出了一种新方法与证明增加CRISPR基因组编辑能力。他们告诉我们,他们的Alt-RTM CRISPR-Cas9系统研究人员提供了很多好处,包括提高药效和安全性。
了解更多关于这个新系统,以及它如何帮助研究人员,我们采访了马克Behlke,医学博士。首席科学官踊跃参与。
阿瑟:如何IDT的Alt-RTM CRISPR-Cas9系统克服问题的嵌合single-guide rna (sgRNAs) ?
马克Behlke (MB):单指导rna工作很好,但有一定的局限性。他们设计使它有效获取单个功能CRISPR指南从向量表达式而不是依赖两个单独的rna被合成然后必须退火post-synthesis (shRNA与核的情况一样,当由一个表达载体)。这个系统的局限性包括需要克隆测序的一个表达式构造或需要自己做体外转录sgRNAs(溶)。行sgRNAs工作,但需要时间和劳动在板凳上。自制溶sgRNAs很难QC,调查员已经把它相信转录产品是好的质量。或许更重要的是,长期看sgRNAs是强大的先天免疫系统的触发器,它可以杀死一些细胞类型。这不是一个问题在塑料改编细胞系如海拉或HEK293细胞,但可以当主要的哺乳动物细胞是研究一个重要问题。
Alt-RTM产品采用合成RNA寡核苷酸,哪来准备使用在管或板,这意味着现在没有在实验室需要劳动或QC CRISPR指南——他们会立即准备使用,就像PCR引物。此外,踊跃参与优化CRISPR RNA (crRNA)和trans-activating crRNA (tracrRNA)序列,并认真修改添加化学改善功能活动和限制触发免疫反应的风险,导致健康的细胞。
阿瑟:改进可以研究人员使用Alt-RTM CRISPR-Cas9系统期望看到?
MB:更快、更少的劳动密集型的实验中,提高编辑效率,降低毒性。
阿瑟:你相信CRISPR / Cas9可以继续受益于“技术推动”正确的方向吗?这种方法对于未来具有潜力的治疗应用程序吗?
m:是的,这仍然是一个非常年轻的技术,我们应该期待持续改进。多个制药和生物技术公司已经在治疗CRISPR技术的应用程序。我完全预料到体外,后来体内医疗用方法将有助于治疗人类疾病。
阿瑟:最近我们听到的另一个CRISPR系统看似潜力巨大,CRISPR / Cpf1。这个发现对CRISPR / Cas9意味着什么?
现有的酿脓链球菌(间谍)CRISPR / Cas9系统的工作原理,和工具可从多个源供研究人员使用。发现一个新的编辑平台不会改变现有的间谍Cas9系统工作良好。相反,新系统扩展了工具箱并添加新的可能性。最重要的不同氨基酸球菌属()Cpf1系统有一个“TTTN”帕姆序列与“NGG”帕姆从间谍Cas9序列。这个扩展序列空间,可以针对包括at富集大量的基因组,疟疾等,例如,或使at富集网站在哺乳动物基因组的目标。新的CRISPR系统不会让间谍Cas9过时了,而是会增加选择研究。
马克Behlke,医学博士说阿什利董事会。希礼是总编辑技术网络。188金宝搏备用
解决与当前系统相关的一些问题,IDT最近推出了一种新方法与证明增加CRISPR基因组编辑能力。他们告诉我们,他们的Alt-RTM CRISPR-Cas9系统研究人员提供了很多好处,包括提高药效和安全性。
了解更多关于这个新系统,以及它如何帮助研究人员,我们采访了马克Behlke,医学博士。首席科学官踊跃参与。
阿瑟:如何IDT的Alt-RTM CRISPR-Cas9系统克服问题的嵌合single-guide rna (sgRNAs) ?
马克Behlke (MB):单指导rna工作很好,但有一定的局限性。他们设计使它有效获取单个功能CRISPR指南从向量表达式而不是依赖两个单独的rna被合成然后必须退火post-synthesis (shRNA与核的情况一样,当由一个表达载体)。这个系统的局限性包括需要克隆测序的一个表达式构造或需要自己做体外转录sgRNAs(溶)。行sgRNAs工作,但需要时间和劳动在板凳上。自制溶sgRNAs很难QC,调查员已经把它相信转录产品是好的质量。或许更重要的是,长期看sgRNAs是强大的先天免疫系统的触发器,它可以杀死一些细胞类型。这不是一个问题在塑料改编细胞系如海拉或HEK293细胞,但可以当主要的哺乳动物细胞是研究一个重要问题。
Alt-RTM产品采用合成RNA寡核苷酸,哪来准备使用在管或板,这意味着现在没有在实验室需要劳动或QC CRISPR指南——他们会立即准备使用,就像PCR引物。此外,踊跃参与优化CRISPR RNA (crRNA)和trans-activating crRNA (tracrRNA)序列,并认真修改添加化学改善功能活动和限制触发免疫反应的风险,导致健康的细胞。
阿瑟:改进可以研究人员使用Alt-RTM CRISPR-Cas9系统期望看到?
MB:更快、更少的劳动密集型的实验中,提高编辑效率,降低毒性。
阿瑟:你相信CRISPR / Cas9可以继续受益于“技术推动”正确的方向吗?这种方法对于未来具有潜力的治疗应用程序吗?
m:是的,这仍然是一个非常年轻的技术,我们应该期待持续改进。多个制药和生物技术公司已经在治疗CRISPR技术的应用程序。我完全预料到体外,后来体内医疗用方法将有助于治疗人类疾病。
阿瑟:最近我们听到的另一个CRISPR系统看似潜力巨大,CRISPR / Cpf1。这个发现对CRISPR / Cas9意味着什么?
现有的酿脓链球菌(间谍)CRISPR / Cas9系统的工作原理,和工具可从多个源供研究人员使用。发现一个新的编辑平台不会改变现有的间谍Cas9系统工作良好。相反,新系统扩展了工具箱并添加新的可能性。最重要的不同氨基酸球菌属()Cpf1系统有一个“TTTN”帕姆序列与“NGG”帕姆从间谍Cas9序列。这个扩展序列空间,可以针对包括at富集大量的基因组,疟疾等,例如,或使at富集网站在哺乳动物基因组的目标。新的CRISPR系统不会让间谍Cas9过时了,而是会增加选择研究。
马克Behlke,医学博士说阿什利董事会。希礼是总编辑技术网络。188金宝搏备用
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