利用MALDI MS/MS数据自动表征脂肪的电荷远程破碎离子和脂肪酸破碎峰特征
简介
MALDI质谱法已被用于直接组织分析检测磷脂酰胆碱(1-4)。最近，使用MALDI MS/MS在复杂混合物中鉴定出了三酰甘油和磷脂酰胆碱(5,6)，其中电荷远程碎片(CRF)以及其他A-、B-、C-、G和J-离子是决定因素，如最近所述(7,8,9)。CRF离子促进双键的定位和脂肪酸链的分支。然而，MALDI MS/MS数据分析的主要挑战是过程中产生的大量数据。上述信号的注释需要耗时的手工谱解释。我们开发了一种通过MS/MS数据表征脂质的软件工具，简化了这种类型的数据分析。
方法
使用MALDI MS和MS/MS分析了橄榄油等脂肪的商业标准和脂质。用DHB基质在正离子模式下制备样品。以1 keV碰撞能量，空气作为碰撞气体(5 x10-6 Torr)获取MS/MS数据。sim血脂®数据库已创建包含36299脂类和1305386结构特定的硅电荷远程碎片(CRF)离子以及其他特征离子(7,8,9)。simfatty根据前体m/z值和其他信息为每种脂质MS/MS谱创建候选结构列表。对于每个候选物，硅内片段离子与实验MS/MS数据相匹配。为了区分等压候选者，开发了一种评分机制。
初步结果/文摘
三酰甘油(TAG)均被检测为单带电的钠化分子。在sim血脂®软件中对TAGs的MS/MS数据进行批量分析。所有的结构都被程序正确识别。对m/z 577.4492(已知30:0脂肪酸链分布，3种脂肪酸长度相同)的TAG的MS/MS谱进行分析，结果得出5种不同的候选结构，其中正确的结构具有共同名称“1,2,3-三甘油酯-甘油”作为最高得分的脂类，其次是4种不同的二酰基甘油，对应于31:0脂肪酸链分布，2种脂肪酸长度不同。CRF离子以14 Da的质量差分离，表明CH2基团的丢失，这是脂肪酸链内C-C键断裂的结果。CRF离子显示12Da的损失表明双键和C=C键的断裂。对于该数据，由于候选结构中存在相似的脂肪酸以及密切相关的头基，仅凭CRF离子无法区分正确的结构。该程序区分基于TAG的特征离子。为了验证该项目的结果，我们将该技术应用于分析来自不同来源的脂类，如橄榄油品牌、人造黄油和黄油。
MALDI质谱法已被用于直接组织分析检测磷脂酰胆碱(1-4)。最近，使用MALDI MS/MS在复杂混合物中鉴定出了三酰甘油和磷脂酰胆碱(5,6)，其中电荷远程碎片(CRF)以及其他A-、B-、C-、G和J-离子是决定因素，如最近所述(7,8,9)。CRF离子促进双键的定位和脂肪酸链的分支。然而，MALDI MS/MS数据分析的主要挑战是过程中产生的大量数据。上述信号的注释需要耗时的手工谱解释。我们开发了一种通过MS/MS数据表征脂质的软件工具，简化了这种类型的数据分析。
方法
使用MALDI MS和MS/MS分析了橄榄油等脂肪的商业标准和脂质。用DHB基质在正离子模式下制备样品。以1 keV碰撞能量，空气作为碰撞气体(5 x10-6 Torr)获取MS/MS数据。sim血脂®数据库已创建包含36299脂类和1305386结构特定的硅电荷远程碎片(CRF)离子以及其他特征离子(7,8,9)。simfatty根据前体m/z值和其他信息为每种脂质MS/MS谱创建候选结构列表。对于每个候选物，硅内片段离子与实验MS/MS数据相匹配。为了区分等压候选者，开发了一种评分机制。
初步结果/文摘
三酰甘油(TAG)均被检测为单带电的钠化分子。在sim血脂®软件中对TAGs的MS/MS数据进行批量分析。所有的结构都被程序正确识别。对m/z 577.4492(已知30:0脂肪酸链分布，3种脂肪酸长度相同)的TAG的MS/MS谱进行分析，结果得出5种不同的候选结构，其中正确的结构具有共同名称“1,2,3-三甘油酯-甘油”作为最高得分的脂类，其次是4种不同的二酰基甘油，对应于31:0脂肪酸链分布，2种脂肪酸长度不同。CRF离子以14 Da的质量差分离，表明CH2基团的丢失，这是脂肪酸链内C-C键断裂的结果。CRF离子显示12Da的损失表明双键和C=C键的断裂。对于该数据，由于候选结构中存在相似的脂肪酸以及密切相关的头基，仅凭CRF离子无法区分正确的结构。该程序区分基于TAG的特征离子。为了验证该项目的结果，我们将该技术应用于分析来自不同来源的脂类，如橄榄油品牌、人造黄油和黄油。
广告
