hPSCs神经诱导的单层培养方法
多能神经祖细胞(NPCs)产生的主要细胞类型的中枢神经系统(CNS):神经元,星形胶质细胞和少突胶质细胞。人类多能干细胞(hPSCs),包括胚胎干细胞(ES)细胞和诱导多能干细胞(iPS)细胞,可以通过多种方法定向分化为npc。这一过程被称为“神经诱导”,必须高效可靠,才能为下游应用生成高质量的npc。hpsc衍生的npc广泛用于研究人类神经系统发育、神经疾病建模和筛选潜在的治疗分子。多年来,人类ES和iPS细胞神经诱导的主要方法涉及与基质细胞系共培养或形成胚状体(EB)。最近,研究表明,来自人类ES和iPS细胞的神经诱导也可以在单层培养系统中实现,其中人类ES和iPS细胞被镀在定义的基质上,并暴露于诱导actor。1,2 STEMdiff™神经诱导培养基是一种定义的、无血清的培养基,用于从hPSCs中生成npc。该产品的标准方案包括EB的形成和神经莲座的选择,以在12天内获得cns型npc的高度富集培养(图1A, 2A)。在本技术公报中,我们描述了在单层培养系统中使用STEMdiff™神经诱导培养基进行神经诱导的方法(图1B, 2B)。使用该协议,cns类型的npc可以在6 ~ 9天内从人类ES或iPS细胞中生成。
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