用于评估潜在神经毒物的人类神经球干细胞模型的基于图像的分析

环境化学品的发育性神经毒性(DNT)对人类健康构成威胁，因为发育中的神经系统特别容易受到毒物暴露的影响。由此产生的神经缺陷可能会对家庭和社会造成长期的经济和情感影响。目前DNT测试指南涉及使用动物模型;主要是啮齿动物，需要大量的时间和成本;特别是由于需要检测的化学品积压。这一需求，加上目前和未来拟议的关于使用动物试验模型的法规，使得必须找到新的模型，减少动物实验，同时提供合适的方法来测试新化学品。三维细胞模型，结合人类神经干细胞(hNSCs)聚集到神经球，被认为是DNT测试的可行替代方案。该体外培养系统可以概括大脑发育过程，包括增殖、迁移、分化和凋亡。通过包括人类细胞而不是小鼠细胞，该系统还满足了规避体内测试和实际暴露效应之间物种差异的缺点的建议。在这里，我们展示了一个由hNSCs组成的三维神经球模型，对几种潜在的神经毒物进行毒性测试。 A specialized spheroid microplate was used to create and maintain cells in the 3D model. 3D neurosphere proliferation, multipotency, and continued differentiation into neurons, astrocytes, and oligodendrocytes was initially validated. Neurotoxicity testing was then performed using neurospheres maintained in the 3D spheroid plate. Induced levels of oxidative stress, apoptotic and necrotic activity within treated neurospheres were evaluated and compared to negative control spheres.